血管内皮生长因子表达载体的构建及在内皮祖细胞中的表达
陈柏松
张胜利
耿红全
潘骏
吴少峰
陈方
1.上海交通大学医学院附属新华医院泌尿外科,上海市,2000922.上海交通大学医学院附属新华医院泌尿外科,上海市,2000923.上海交通大学医学院附属新华医院泌尿外科,上海市,2000924.上海交通大学医学院附属新华医院泌尿外科,上海市,2000925.上海交通大学医学院附属新华医院泌尿外科,上海市,2000926.上海交通大学医学院附属新华医院泌尿外科,上海市,200092
摘要：背景: 血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)具有很强的促进血管生成作用,但构建其真核表达质粒是否可转染血管内皮祖细胞并完整表达还不清楚.目的: 构建VEGF表达载体,并观察其在内皮祖细胞中的表达情况.设计、时间及地点: 观察性试验,于2007-12/2008-03在上海交通大学医学院附属新华医院科研中心实验室完成.材料: 质粒PDC315-VEGF165自备,质粒pIRES2-EGFP由美国国立卫生研究院Stanko Stojilkovic教授惠赠.方法: 运有DNA重组技术构建VEGF表达载体pIRES2-EGFP-VEGF.应用脂质体包裹的方法将载体转染猪外周血血管内皮祖细胞.主要观察指标: 采用荧光显微镜观察VEGF在内皮祖细胞内的表达,反转录-聚合酶链反应法检测VEGFmRNA表达水平,ELISA检测VEGF165蛋白表达情况.结果: 成功构建VEGF真核表达载体pIRES2-EGFP-VEGF.转染重组质粒pIRES2-EGFP-VEGF后,在内皮祖细胞内有VEGF的表达,VEGFmRNA和VEGF165蛋白表达水平均明显增加.结论: VEGF表达载体转染猪外周血血管内皮祖细胞后能有效增加VEGF基因的表达,能够获得较高水平的VEGF蛋白.
关键词：血管内皮生长因子真核表达载体内皮祖细胞基因表达
分类号：R392(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30672108)上海交通大学医学院博士点建设基金(BXJ0725)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 9853-9856 )
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