Ca2+在电磁场刺激骨髓间充质干细胞增殖与分化过程中的内流变化
杨国华1
吴华1
赵东明1
刘伟军2
1.华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科,湖北省武汉市,4300302.武汉市普爱医院骨科,湖北省武汉市,430030
摘要：背景:已证实电磁场可通过cAMP-蛋白激酶A信号转导系统调控骨髓间充质于细胞的增殖与分化.但同样作为第二信使的Ca2+相关作用报道较少.目的:观察钙拮抗剂维拉帕米对电磁场刺激骨髓间充质干细胞增殖与分化的影响,以推断Ca2+在此过程中的内流变化.设计、时问及地点:电刺激细胞学体外观察,于2005-04/06在同济医院矫形外科实验室完成.材料:清洁级4～5周龄SD大鼠6只,维拉帕米为Sigma公司产品,Helmholtz线圈式磁场发生器由海军工程大学电机系设计制造.方法:贴壁法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,胰蛋白酶消化传代.取生长良好的第4代细胞,调节密度至1×107L-1,将其分种于4块96孔板内,200μL/孔.正常对照组不进行任何干预:暴磁组接种第2天将细胞放于置有Helmholtz线圈式磁场发生器的37℃、体积分数为0.05的CO2饱和湿度细胞培养箱中进行暴磁,磁场强度0.8 mT,频率50Hz,每次暴磁30min,间隔12h,共6次;维拉帕米组加入20 μ mol/L维拉帕米;联合组加入20 μ mol/L维拉帕米后进行暴磁.主要观察指标:MTT法检测细胞增殖活性,向成骨细胞分化碱性磷酸酶的含量,改良Gomori氏钙钻法染色定性观察.结果:暴磁3 d后,与正常对照组比较,暴磁组细胞增殖活性明显升高(P<0.01),加入维拉帕米进行药物干预后这种促细胞增殖效应消失.未经暴磁的正常对照组、维拉帕米组细胞碱性磷酸酶含量基本相似,均明显高于其余2组(P<0.01);联合组细胞碱性磷酸酶含量高于暴磁组(P<0.01).碱性磷酸酶染色定性分析结果与上述数据基本一致.结论:在50Hz、0.8 mT电磁场作用下,骨髓间充质干细胞Ca2+内流发生变化,且该变化在骨髓间充质干细胞向成骨方向分化过程中产生部分抑制作用,在促其增殖过程中起主导作用.
关键词：骨髓问充质干细胞电磁场碱性磷酸酶维拉帕米
分类号：R394.2(医学遗传学)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 10109-10112 )
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