雌性激素对骺生长板软骨细胞周期调节蛋白的作用

李继斌; 黎海芪; 王松艳

摘要：背景:长骨干骺端生长板是哺乳动物在生长发育期间实现线性生长的结构基础.激素及生长因子对生长板软骨细胞的调节作用与生长、生长板老化直至完全闭合具有决定性意义.目的:观察雌性激素对骺生长板软骨细胞周期蛋白表达的影响,及其在生长板闭合过程中的作用.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2003-07/2005-07在重庆医科大学动物实验中心完成.材料:健康雌性12周龄新西兰白兔30只,平均体质量1.57 kg.方法:30只新西兰白兔性发育前(12周龄)行双侧卵巢切除,4周后(16周龄)随机抽签法分为2组:雌二醇组每周苯甲酸雌二醇肌肉注射,140μg/kg;对照组:每蒯不含雌二醇的等体积火菌棉籽油肌肉注射(1.5 mL/kg).两组动物分别于处理后第4,7,10周(20,23,26周龄)取双侧股骨远端、胫骨近端干骺部分生长板作免疫组织化学染色.主要观察指标:两组动物不同年龄股骨和胫骨末闭合骺生长板软骨细胞细胞周期蛋白D1、P53、P21WAF1/CIP1及P16INK4A蛋白的表达.结果:①雌二醇组雌兔实验后4周相当于性发育早期(20周龄),胫骨近端、股骨远端骺生长板细胞周期蛋白D1表达水平显著高于同年龄期对照组(P<0.05);7周后(23周龄)胫骨近端骺生长板细胞周期蛋白D1表达仍高十对照组雌兔(P<0.05),股骨远端骺生长板细胞周期蛋白D1表达开始降低,与对照组雌兔无显著差异(P>0.05).②实验后4,7周(20-23周龄)雌二醇组雌兔股骨远端和胫骨近端骺生长板软骨细胞P53蛋白表达明显高于对照组(P<0.05).⑧雌二醇组P21WAF1/CIP1的表达增高则出现在实验后7周(23周龄),与对照组相比,差异有显著性意义(P<0.05).④两组雌兔骺生长板P16INK4A蛋白免疫组织化学检测均为阴性.结论:雌二醇具有加速生长板闭合过程的作用,可能与雌性激素长期作用于软骨细胞后诱导细胞周期抑制蛋白如P21WAF1/CIP1、P53有关.