功能化硅壳荧光纳米载体在A549细胞中的细胞标记
赵焕英1
隋雷鸣2
李峰3
李睿3
蔡青2
邓君2
高尔静2
姬曼2
杨慧3
1.首都医科大学北京神经科学研究所,北京市神经再生修复研究重点实验室,北京市100069;首都医科大学医学实验与测试中心,北京市1000692.首都医科大学医学实验与测试中心,北京市,1000693.首都医科大学北京神经科学研究所,北京市神经再生修复研究重点实验室,北京市100069
摘要：背景:硅壳荧光磁性纳米载体表面功能化后不仅仍具备荧光性、磁性功能,而且还具有携药和携基因潜能,片有良好的生物相容性,可实现对细胞的标记功能.目的:制备Fe3O4@SiO2(FITC)-3-异氰基丙基三乙氧基硅烷-聚酰胺-胺树状大分子(G2.O)纳米颗粒型多功能纳米载体,并评估纳米载体标记A549细胞的能力,在细胞内的分布及与细胞的生物相容性.设计、时间及地点: 观察性实验,于2006-06/2007-06在首都医科大学化学生物学与药学院合成了纳米载体,2007-07/2008-07在首都医科大学神经科学研究所完成了复合纳米载体的生物评估.材料和方法:15 μ L 3-异氰基丙基三乙氧基硅烷和195.12 mg聚酰胺-胺树状大分子(G2)在无水甲醇环境中反应24 h,得到目的产物3-异氰基丙基三乙氧基硅烷-聚酰胺-胺树状大分子:然后将合成好的Fe3O4@SiO2(FITC)与3-异氰基丙基三乙氧基硅烷-聚酰胺-胺树状大分子在甲醇溶液环境下,避光搅拌48 h,用水磁铁分离固体,并经无水乙醇沈后真空干燥,得到最终目标载体.主要观察指标:透射电镜观察纳米载体的大小和细胞内分布,Zeta电位测定其生理情况下电荷情况,激光共聚焦显微镜下观察FITC、DAPI和Lysotracker Blue细胞染色情况以评估载体在细胞内定位,CCK-8评估其对细胞毒性作用,流式细胞计数法评价其标记细胞的效率.结果:透射电镜分析表明,修饰的硅壳纳米载体大小约为80 nm,pH=7.4,纳米载体zeta电位为+23.93 mV.透射电镜和激光共聚焦显微镜结果表明纳米粒主要存在细胞浆中,且能被溶酶体吞噬.CCK-8结果显示纳米载体的浓度高达1 g/L时仍无明显的毒件作用.流式细胞计数结果表明,细胞摄取纳米粒呈浓度和时间依赖性.结论:成功制备了硅壳结构的荧光磁性纳米载体,主要分布在细胞浆中,且细胞相容性好.
关键词：SiO2纳米粒子生物材料细胞相容性细胞标记
分类号：R318(医用一般科学)
资助基金：国家重点基础研究发展计划（973计划）(2006CB500706)国家自然科学基金(2006CB500706)国家自然科学基金(30670655)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1486-1490 )
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