体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向血管内皮细胞的分化
贾立山
周云
张亚
张建
张婷
严向明
1.苏州大学附属儿童医院外科,江苏省苏州市,2150032.苏州大学附属儿童医院外科,江苏省苏州市,2150033.苏州大学附属儿童医院外科,江苏省苏州市,2150034.苏州大学附属儿童医院外科,江苏省苏州市,2150035.苏州大学附属儿童医院外科,江苏省苏州市,2150036.苏州大学附属儿童医院外科,江苏省苏州市,215003
摘要:背景:目前骨髓间充质干细胞已经应用于多种组织血管的修复,但涉及尿道血管组织的报道甚少.目的:探讨体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为血管内皮细胞的可行性.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-07/2008-01在苏州大学附属儿童医院儿科研究所完成.材料:清洁级4周龄SD大鼠4只,由苏州大学实验动物中心提供.作为诱导剂的血管内皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞因子为Sigma公司产品.方法:密度梯度离心法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,待细胞达80%~90%融合时消化传代.传至第3代,细胞按1×10~9L~(-1)密度接种,加入含血管内皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞因子的DMEM培养基向血管内皮细胞诱导分化.主要观察指标:MTT测定细胞生长曲线,免疫荧光法检测细胞表面CD44与Vimentin的表达,光学倒置显微镜下观察诱导后细胞形态变化,电镜观察细胞超微结构.结果:骨髓间充质干细胞生长曲线呈倒"S"型,第3代细胞表面CD44和Vimentin表达阳性率分别为89.3%和85.6%.向血管内皮细胞诱导1~3 d细胞争梭形或纺锤形,7 d后变成不规则的圆形或椭圆形,胞浆淡染,胞核较大,核染色质粗,且部分细胞死亡,14 d后整瓶细胞呈漩涡状生长,21~25 d后细胞密集处呈内皮细胞特有的铺路石样排列.诱导后第21天,细胞浆内可见微管、微丝及W-P小体.结论:血管内皮细胞生长因子与碱性成纤维细胞因子联合诱导条件下,骨髓间充质干细胞在体外可分化为血管内皮细胞.
关键词:骨髓间充质干细胞内皮细胞血管内皮细胞生长因子碱性成纤维细胞因子分化
分类号:R394.2(医学遗传学)
资助基金:苏州市社会发展科技计划项目(SS08021)
论文发表日期:2009-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 3698-3702 )
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中国组织工程研究与临床康复

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北大核心CSTPCD
ISSN:1673-8225
年,卷(期):2009,13(19)
所属栏目:技术与方法