改良诱导方案诱导SD大鼠脂肪源性干细胞定向分化为软骨细胞
安荣泽
王兆杰
张强
杨震
于立志
齐新文
杨晋
1.遵义医学院第五附属(珠海)医院骨科,广东省 珠海市,5191002.遵义医学院第五附属(珠海)医院骨科,广东省 珠海市,5191003.遵义医学院第五附属(珠海)医院骨科,广东省 珠海市,5191004.遵义医学院第五附属(珠海)医院骨科,广东省 珠海市,5191005.遵义医学院第五附属(珠海)医院骨科,广东省 珠海市,5191006.遵义医学院第五附属(珠海)医院骨科,广东省 珠海市,5191007.遵义医学院第五附属(珠海)医院骨科,广东省 珠海市,519100
摘要：背景:软骨组织工程是骨科研究的热点,在种子细胞的研究上由于软骨细胞存在老化现象更多的研究集中在干细胞向软骨细胞分化上.分化条件经历单细胞因子、联合细胞因子及贯续细胞因子的应用.目的:观察改良诱导方案诱导SD大鼠脂肪源性干细胞定向分化为软骨细胞的能力.设计、时间及地点;观察性实验,于2008-06/12在遵义医学院珠海校区中心实验室完成.I材料:SPF级健康SD大鼠5只,鼠龄18～22 d,体质量约25g,用于脂肪干细胞的培养基扩增.方法:在无菌条件下从SD大鼠腹股沟区取皮下脂肪组织约3 g,Ⅰ型胶原酶消化后,1 000 r/min离心10 min,待细胞长满瓶底80%时用2.5 g/L胰蛋白酶消化,按1:2或1:3比例传代培养.加入软骨诱导培养基14 d后阿新蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组织化学检测脂肪干细胞向软骨细胞的诱导分化.主要观察指标:流式细胞仪检测大鼠脂肪干细胞表面CD44、CD45和CD49d的表达.结果:SD大鼠脂肪组织分离培养出的细胞经流式细胞仪检测CD44、CD49d表达阳性,CD45表达阴性.加入软骨诱导培养基定向诱导72 h后,细胞生长缓慢,逐渐变成圆形,并渐渐有软骨结节形成;诱导分化2周后,阿新蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组织化学检测阳性.结论:SD大鼠脂肪组织能够分离培养出脂肪干细胞,生物学特性与骨髓间充质干细胞相似,能向软骨细胞分化.
关键词：脂肪源性干细胞软骨细胞分化
分类号：R394.2(医学遗传学)
资助基金：贵州省科技厅资助项目(黔科通NY字[2006]62-2)珠海市医学重点专科建设基金资助(珠卫[2008]80)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 7052-7056 )
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