以Triton X-100和脱氧胆酸钠为萃取剂制备兔脱细胞神经基质:有最佳时间吗?
姜炜鹏1
左金华2
李继奎2
刘道峰3
徐杰4
丁长岭5
1.滨州医学院,山东省滨州市,2566032.滨州医学院附属医院口腔颌面外科,山东省滨州市,2566033.东营市胜利油田中心医院口腔科,山东省东营市,2571004.济南市口腔医院口腔颌面外科,山东省济南市,2500005.滨州医学院附属医院,山东省滨州市,256603
摘要：背景:与其他脱细胞神经基质制备方法相比,化学萃取的去细胞同种异系(体)神经组织内细胞成分可以较完全地清除,进一步减少了发生免疫排斥反应的可能性,并能较好地保留神经支架的完整性,但制备过程中的相关问题有许多尚需讨论.目的:应用Triton X-100和脱氧胆酸钠化学萃取剂处理新西兰大白兔的面神经,提出脱细胞神经基质制备的所需试剂及最佳时间.设计、时间及地点:随机分组,对比观察细胞学实验,于2009-02/06在滨州医学院附属医院口腔科学实验室完成.材料:3月龄新西兰大白兔15只,体质量2.5-3.0 kg.Triton X-100、脱氧胆酸钠由美国Sigma公司提供.方法:取兔双侧面神经,在手术显微镜下去除神经表面的脂肪组织和神经外膜,将其分为每段10 mm长,共66条.将66条神经随机分成11组,每组6条.除正常对照组外,其余10组均放入培养皿中,先用蒸馏水室温下浸浴12 h,以使细胞和髓鞘在低渗液体中膨胀,使部分细胞被胀破:然后将其中5组置于3%Triton X-100 12,24,36,48,60 h,室温下振荡,另外5组用3%Triton X-100和4%脱氧胆酸钠先后作用12 h(为1个周期),室温下反复振荡1-5个周期.主要观察指标:常规苏木精-伊红染色,光镜下观察去细胞程度及纤维管道结构的完整性.结果:单独应用Triton X-100处理神经即使作用60 h,仍不能将神经中的所有细胞成分去除,且许旺细胞基底膜有较大破坏;Triton X-100配合脱氧胆酸钠处理处理2个周期,可有效地去除神经中的细胞成分及神经纤维髓鞘和轴突,保留完整的许旺细胞基底膜,周边可见神经外膜和束膜.结论:大白兔面神经经Triton X-100和脱氧胆酸钠室温处理2个周期,并不停地振荡,可完全去除神经组织中的所有细胞成分,保留完整的许旺细胞基底膜,得到脱细胞的神经基质.
关键词：脱细胞神经制备条件基质
分类号：R318(医用一般科学)
资助基金：山东省医药卫生科技项目(2007HW032)山东省教育厅科技项目(J08LG16)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 9241-9244 )
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