人脐带间充质干细胞在3种不同培养体系中的生长状况及腺病毒感染效率
洪敬欣1
张茜真2
韩俊领3
刘辉4
刘剑1
邱录贵3
1.协和干细胞基因工程有限公司,天津市脐带血造血干细胞库,天津市,3003842.解放军第二军医大学东方肝胆外科医院病毒基因治疗实验室,上海市,200438;浙江理工大学生命科学学院新元医学与生物技术研究所,浙江省杭州市,3100183.协和干细胞基因工程有限公司,天津市脐带血造血干细胞库,天津市,300384;中国医学科学院,北京协和医学院,血液学研究所,血液病医院,天津市,3000204.解放军第二军医大学东方肝胆外科医院病毒基因治疗实验室,上海市,200438
摘要：背景:目前所报道的脐带间充质干细胞体外培养条件及培养效率不尽相同,尚缺乏统一标准.而且由于不同来源的间充质干细胞生物学特征尚有一定差异,因此建立脐带间充质干细胞简便、高效的培养体系十分必要.目的:观察人脐带来源的间充质干细胞在体外不同培养体系中的生长状态,以及不同腺病毒感染的效率.方法:采用胶原酶消化法从正常足月新生儿脐带中分离出间充质干细胞,贴壁法纯化培养,细胞贴壁后利用低糖DMEM,MesenPRO RS~(TM) Medium和STEMPRO~(R) MSC SFM这3种培养体系进行体外扩增.取对数生长期的第3～5脐带间充质干细胞,应用腺病毒Ad5-EGFP,Ad5/11-EGFP,Ad5/35-EGFP分别以感染复数=1,10,100进行感染,分别于感染后24,56,72 h倒置荧光显微镜观察病毒感染及绿色荧光表达情况.结果与结论:使用低糖DMEM培养的细胞初期融合时间长,STEMPRO~(R) MSC SFM培养的细胞虽然连接紧密,但消化传代后不易贴壁,而MesenPRO RS~(TM) Medium培养的细胞在相同时间内能达到较高的细胞密度,更适于脐带间充质干细胞的体外扩增.Ad5/35-EGFP感染脐带间充质干细胞的效率明显高于其他两种腺病毒,但可导致细胞凋亡;腺病毒Ad5/11-EGFP对脐带间充质干细胞的感染效率较佳,随着感染复数的升高,所表达的荧光强度也逐渐增大.
关键词：培养体系腺病毒感染效率脐带间充质干细胞干细胞
分类号：R394.2(医学遗传学)
资助基金：天津市科技创新专项(08FDZDSH03000)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 42-47 )
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