小干扰RNA靶向血管内皮生长因子基因抑制胆囊癌细胞的增殖体内外实验
曲华伟
张阳德
陈玉祥
赵劲风
廖明媚
何剪太
1.中南大学湘雅医院卫生部肝胆肠外科研究中心,湖南省长沙市,4100082.中南大学湘雅医院卫生部肝胆肠外科研究中心,湖南省长沙市,4100083.中南大学湘雅医院卫生部肝胆肠外科研究中心,湖南省长沙市,4100084.中南大学湘雅医院卫生部肝胆肠外科研究中心,湖南省长沙市,4100085.中南大学湘雅医院卫生部肝胆肠外科研究中心,湖南省长沙市,4100086.中南大学湘雅医院卫生部肝胆肠外科研究中心,湖南省长沙市,410008
摘要：背景:已有研究发现RNA干扰可通过抑制血管内皮生长因子基因表达抑制肿瘤细胞增殖,但目前关于应用RNA干扰胆囊癌血管内皮生长表达的研究国内外尚无相关报道.目的:构建并筛选靶向血管内皮生长因子的shRNA,观察RNA干扰血管内皮生长因子的效果及对胆囊癌细胞增殖的影响.方法:设计VEGF-shRNA片段,连接到pCYU6/GFPINeo-shRNA质粒载体上.shRNA转染胆囊癌细胞.建立裸鼠胆囊癌模型,随机分成空白组、阴性对照组、实验组(干扰pShRNA-VEGF2),每组6只.瘤内注射shRNA.荧光显微镜观察细胞生长状态,半定量反转录-聚合酶链反应法与实时荧光定量聚合酶链反应检测RNA干扰效果,观察胆囊癌裸鼠模型肿瘤体积变化. 结果与结论:RNA干扰血管内皮生长因子后,胆囊癌细胞细胞变圆,皱缩,部分细胞死亡脱落.ShRNA片段血管内皮生长因子2、血管内皮生长因子1均可抑制VEGF mRNA表达,抑制率可达86%,82%.裸鼠肿瘤模型中实验组肿瘤与对照组、阴性组相比明显变小,且生长缓慢(P<0.05),而对照组和阴性组在肿瘤大小及生长趋势上没有明显的差别.实验构建的hVEGF-shRNA质粒表达载体通过抑制血管内皮生长因子的表达,抑制胆囊癌细胞增殖,从而达到间接治疗肿瘤的目的.
关键词：RNA干扰shRNA胆囊癌细胞血管内皮生长因子基因治疗
分类号：R392.114(医学免疫学)
资助基金：中南大学博士研究生学位论文创新项目资助(2009bsxt006)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 258-261 )
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