人脐带沃顿胶间充质干细胞与脑肿瘤干细胞的共培养
田毅1
关方霞2
胡祥3
杨波1
杜英4
周长辉2
巴云涛5
谷晨熙6
雷宁静2
王晓薇7
1.郑州大学第一附属医院神经外科,河南省郑州市450052;河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室,河南省郑州市,4500522.郑州大学,生物工程系,河南省郑州市4500013.江苏省干细胞与生物治疗公共技术服务平台,江苏省泰州市,225300;深圳市北科细胞工程研究所,广东省深圳市5180004.郑州大学基础医学院微生物与免疫学教研室,河南省郑州市,4500525.郑州大学第一附属医院神经外科,河南省郑州市,4500526.郑州大学,临床医学系,河南省郑州市4500017.湖南师范大学生命科学学院,湖南省长沙市,410081
摘要:背景:人脐带沃顿胶间充质干细胞满足了国际细胞治疗协会规定的间充质干细胞的特点,能够向骨、软骨、脂肪、肌肉、神经细胞诱导分化并支持其他干细胞的扩增,对免疫系统有良好的耐受性,对肿瘤有定向迁徙性.目的:观察人脐带沃顿胶间充质干细胞与脑肿瘤干细胞体外共培养后,脑肿瘤干细胞的生物学变化.方法:以原位法培养人脐带沃顿胶间充质干细胞,以酶消化法培养人脑肿瘤组织脑肿瘤干细胞,以细胞传代法获取第3代细胞.应用不添加任何生长因子的无血清培养基将两种细胞在24孔板中进行直接共培养.第3,7天应用流式细胞术检测细胞CD133表达;应用免疫荧光法检测贴壁细胞巢蛋白和胶质纤维酸性蛋白表达;将第3天离心所得的共培养上清液重悬第3代脑肿瘤干细胞并与正常培养悬浮的第3代脑肿瘤干细胞置入96孔板中,应用酶标仪检测两组细胞生长曲线的差异.结果与结论:两种细胞共培养后在倒置显微镜下可见脑肿瘤干细胞球随着培养时间的增加出现分解、贴壁、分化现象;贴壁的脑肿瘤干细胞免疫荧光染色胶质纤维酸性蛋白和巢蛋白均阳性.恶性程度高的脑肿瘤组织培养的脑肿瘤干细胞表达CD133量越高,而与沃顿胶间充质干细胞共培养后随着时间的变化均出现CD133表达量降低.共培养3 d的上清液培养的脑肿瘤干细胞与正常培养基培养的脑肿瘤干细胞相比,增殖明显受到抑制.结果显示沃顿胶间充质干细胞与脑肿瘤干细胞体外共培养后可限制脑肿瘤干细胞表面标记物CD133的阳性率以及细胞增殖能力并促使其分化.
关键词:共培养脑肿瘤干细胞CD133沃顿胶间充质干细胞人脐带
分类号:R394.2(医学遗传学)
资助基金:郑州大学211三期建设项目(BM2008146)
论文发表日期:2010-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:8( 1721-1728 )
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