重组外源性人热休克蛋白70基因真核表达载体的构建及鉴定
韩世伟1
张阳德2
万小平1
陈玉祥3
1.中南大学卫生部肝胆肠外科研究中心,湖南省长沙市,4100082.中南大学卫生部肝胆肠外科研究中心,湖南省长沙市410008;中南大学卫生部纳米生物技术重点实验室,湖南省长沙市,4100083.中南大学卫生部纳米生物技术重点实验室,湖南省长沙市,410008
摘要：背景:热休克蛋白70的肿瘤免疫作用近年来受到国内外学者的广泛关注,然而目前常用的诱导内源性热休克蛋白70表达的方法,如热应激、缺血预处理等均存在一些弊端.目的:拟构建携带并正确表达外源性人热休克蛋白70基因的重组真核表达载体.方法:外源性热休克蛋白70基因连接入真核表达载体pDC315-EGFP中,转化大肠杆菌感受态细胞,重组真核表达载体外源基因测序及PCR检测鉴定阳性克隆后转染人胚肾293细胞,荧光显微镜及western blot鉴定外源基因在细胞中的表达.结果与结论;经PCR和测序证实外源性人热休克蛋白70基因正确重组入真核表达载体pDC315-EGFP,转染293细胞后荧光显微镜观察到绿色荧光蛋白GFP的表达,Western blot检测到热休克蛋白70在293细胞中有效表达.
关键词：热休克蛋白70真核表达载体基因载体基因重组基因治疗
分类号：R318(医用一般科学)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 3674-3677 )
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