胚胎大鼠神经干细胞双向凝胶电泳方法的建立
刘欢1
黄国伟1
何冰2
杨阳1
赵琳1
1.天津医科大学公共卫生学院,天津市,3000702.武警医学院天津市职业与环境危害生物标志物重点实验室,天津市,300162
摘要：背景:神经干细胞是当今研究热点,双向电泳是蛋白质组学研究的技术基础,有必要建立稳定的神经干细胞蛋白质组双向凝胶电泳技术体系.目的:通过对神经干细胞双向凝胶电泳几个关键步骤的分析,建立稳定、重复性好的神经干细胞双向凝胶电泳的分离方法.方法:采用无血清体外细胞培养方法,培养胚胎大鼠神经干细胞并进行鉴定.提取样品蛋白并裂解,被动水化,采用不同IEF参数,使用PDQuest8.0软件对图谱进行分析和比较.观察不同等点聚焦参数下双向电泳图谱质量,蛋白质点的数目及重复性.结果与结论:不同IEF参数条件下的双向电泳图谱的质量有所不同,增加低电压的除盐步骤有助于去除电泳胶图上的横纹.在80 000 Vh聚焦总能量下,获得较理想的电泳图.通过选用适当的IEF参数.建立了适当的神经干细胞双向凝胶电泳方法.
关键词：胚胎大鼠神经干细胞蛋白质组学双向凝胶电泳神经退行性疾病
分类号：R394.2(医学遗传学)
资助基金：国家自然科学基金(30771797)天津医科大学科学基金(2008Ky12)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 6707-6710 )
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