小分子干扰RNA介导RhoA沉默优化骨髓间充质干细胞的培养
吕刚1
姚鑫2
1.天津医科大学研究生院,天津市,3000002.天津市环湖医院神经外科,天津市,300000
摘要:背景:以往骨髓间充质干细胞的培养方法存在衰老和分化率低等问题.目的:检测是否可以通过沉默RhoA基因的方法优化骨髓间充质干细胞培养.方法:体外培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,经小分子干扰RNA转染以沉默RhoA基因表达,分为3组培养:干细胞组(未转染小分子干扰RNA)、经随机打乱顺序的小分子干扰RNA 转染干细胞组、经小分子干扰RNA 转染的干细胞组.用RT-PCR,Western blot检测骨髓间充质干细胞在转染前后RhoA基因和蛋白的表达.应用细胞生长曲线、MTT比色法观察细胞生长的优化作用,采用流式细胞术测定细胞周期分布的变化.结果与结论:与干细胞组、经随机打乱顺序的小分子干扰RNA 转染干细胞组比较,经小分子干扰RNA 转染的干细胞组RhoA基因和蛋白表达量明显降低(P < 0.05),细胞的生长速度明显增快,细胞周期G0/G1期减少,S期细胞数增多(P < 0.05).说明通过沉默RhoA基因的方法可以促进骨髓间充质干细胞增殖,优化培养方法.
关键词:细胞培养骨髓间充质干细胞RhoARNA干扰干细胞培养
分类号:R394.2(医学遗传学)
论文发表日期:2010-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 8365-8368 )
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