5-溴脱氧尿嘧啶核苷体外标记肌源性干细胞:最佳浓度及时间
张学普1
吕刚1
梅晰凡1
张晓健2
1.辽宁医学院附属第一医院骨科,辽宁省锦州市,1210012.辽宁医学院附属第一医院普外科,辽宁省锦州市,121001
摘要：背景:肌源性干细胞移植入动物体内可以修复骨、肌肉、软骨或神经系统的损伤,但要了解其在体内的迁移、增殖及分化的情况,还需要一种有效、安全的标记方法来追踪其在体内的变化.目的:观察5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记肌源性干细胞的效果,探讨其最佳标记浓度和时间.方法:采用差速贴壁法体外分离SD大鼠肌源性干细胞,免疫细胞化学染色法鉴定第2代细胞并进行细胞计数.以终浓度5,10,15,20 μmol/L的5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记肌源性干细胞,检测其最佳标记浓度,免疫细胞化学染色法分析其标记率;通过MTT法、锥虫蓝排斥实验观察5-溴脱氧尿嘧啶核苷对细胞增殖的影响.结果与结论:免疫细胞化学染色显示肌源性干细胞呈Desmin阳性,阳性率为(85.7±6.0)%;经5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记的肌源性干细胞与未进行标记细胞在活力和增殖上相比未见明显差异(P > 0.05),标记后的肌源性干细胞活细胞率可达(92.3±2.1)%.其中浓度为10,15,20 μmol/L标记组标记效果均优于5 μmol/L标记组,10 μmol/L为最佳工作浓度,最佳标记时间为3 d,标记率为(70.9±4.5)%,随时间延长无明显变化.证实应用5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记肌源性干细胞后,对细胞的活力及增殖情况无影响,标记率也能达到细胞移植对其示踪的要求.
关键词：肌源性干细胞5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记增殖干细胞培养与分化
分类号：R394.2(医学遗传学)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 8407-8410 )
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