胰蛋白酶及Ⅱ型胶原酶消化获取关节软骨细胞
刘明东
盛天金
王万宗
1.解放军南京军区福州总医院442医院内科,福建省宁德市,3521002.解放军南京军区福州总医院442医院内科,福建省宁德市,3521003.解放军南京军区福州总医院442医院内科,福建省宁德市,352100
摘要：背景:近年来,众多研究欲采用体外分离培养的关节软骨细胞作为修复缺损的关节软骨的种子细胞,然而,获得纯化的具有生物活性的关节软骨细胞较为困难.目的:拟运用胰蛋白酶与Ⅱ型胶原酶联合消化获取关节软骨细胞.方法:从SD大鼠的正常股骨及胫骨关节表面获取关节软骨,先后运用0.25%的胰蛋白酶和0.2%Ⅱ型胶原酶消化,显微镜下见大量细胞游离后,弃去大块的未消化的关节软骨碎片,离心,去上清,PBS洗涤2次后,加入软骨细胞原代培养液进行培养、增殖.应用甲苯胺蓝及苏木精-伊红染色方法检验所得细胞是否为关节软骨细胞.结果与结论:在严格掌握酶的浓度及消化时间的前提下,通过0.25%胰蛋白酶和0.2%Ⅱ型胶原酶联合酶解关节软骨的方法,成功从大鼠股骨及胫骨关节软骨内分离培养出细胞,并经过甲苯胺蓝染色及苏木精-伊红染色证实,所得的细胞为具有生物活性的关节软骨细胞.
关键词：关节软骨细胞Ⅱ型胶原酶胰蛋白酶联合消化甲苯胺蓝苏木精-伊红染色
分类号：R318(医用一般科学)
资助基金：福建省青年人才项目(2007F3081)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 8551-8554 )
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