兔膝关节软骨细胞的分离培养及形态学特征
胡志俊1
胡波2
唐德志3
张有为3
王世伟4
王拥军2
1.上海中医药大学脊柱病研究所,上海市,200032;上海中医药大学附属龙华医院,康复科,上海市,2000322.上海中医药大学脊柱病研究所,上海市,2000323.上海中医药大学附属龙华医院,骨伤科,上海市,2000324.上海中医药大学附属龙华医院,康复科,上海市,200032
摘要：背景:软骨细胞是软骨破坏过程中的靶细胞,也是分泌炎性细胞因子的主要细胞之一,体外分离培养骨关节炎软骨细胞存在难度.目的:对兔膝关节软骨细胞进行分离和培养,观察兔软骨细胞的形态学特性.方法:4周龄新西兰白兔采用机械-酶消化法,通过调整胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶的浓度及消化时间来获得较纯的关节软骨细胞,传代培养.通过倒置相差显微镜下观察细胞形态、绘制生长曲线、苏木精-伊红染色、阿利新蓝染色及Ⅱ型胶原免疫荧光染色对细胞进行鉴定.结果与结论:原代培养的软骨细胞以多角形或三角形为主,传代3次后出现反分化.形态学、免疫荧光染色显示细胞培养3代以内可以保持表型的稳定,90%以上的软骨细胞维持多角形或三角形,核为圆形或椭圆形.苏木精-伊红阳性染色为细胞核呈紫蓝色,软骨细胞基质红染,胞浆及细胞周围有紫红色、阿利新蓝染色可见细胞浆和胞膜呈深蓝色、Ⅱ型胶原免疫荧光染色可见胞浆和胞膜清晰绿色荧光,细胞核区域未见明显绿色荧光.结果提示,实验成功建立了软骨细胞分离、培养体系,且3代以内90%以上的软骨细胞生长良好.
关键词：兔关节软骨软骨细胞细胞分离细胞培养组织构建
分类号：R318(医用一般科学)
资助基金：上海市科委基础研究重点项目(08JC1418700)上海市医学领军人才支持计划(05YLJ018)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 8555-8558 )
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