悬滴三步法体外诱导小鼠胚胎干细胞向心肌样细胞的分化
刘官信
王芳洁
赵丹
芦起
1.重庆医科大学儿童医院儿科研究所,儿童发育疾病研究省部共建教育部重点实验室,重庆市,4000142.重庆医科大学儿童医院儿科研究所,儿童发育疾病研究省部共建教育部重点实验室,重庆市,4000143.重庆医科大学儿童医院儿科研究所,儿童发育疾病研究省部共建教育部重点实验室,重庆市,4000144.重庆医科大学儿童医院儿科研究所,儿童发育疾病研究省部共建教育部重点实验室,重庆市,400014
摘要：背景:研究胚胎干细胞分化为心肌细胞的条件和技术,进一步提高诱导分化率、细胞纯度,具有重要的理论和临床应用意义.目的:建立体外诱导胚胎干细胞分化为心肌细胞模型,为体外研究心肌细胞发育提供合适的实验方法.方法:采用悬滴-悬浮-贴壁三步法(悬滴三步法)对未分化的胚胎干细胞进行体外诱导分化培养,并按诱导剂的不同分为6组,Ⅰ组:丹参+5-氮杂胞苷;Ⅱ组:丹参+维甲酸;Ⅲ组:5-氮杂胞苷;Ⅳ组:丹参;Ⅴ组:维甲酸;Ⅵ组:阴性对照.诱导剂加入后9 d,免疫细胞化学方法检测拟胚体α-actinin、myosin、α-actin的表达.结果与结论:诱导剂加入后第2天,倒置显微镜下见拟胚体自发性收缩,每个拟胚体可有1个或多个收缩中心.免疫细胞化学示心肌特异性结构蛋白α-actinin、myosin、α-actin均成阳性表达.Ⅰ组心肌细胞的分化率最高,与Ⅱ、Ⅵ组心肌细胞分化率比较差异有非常显著性意义(P < 0.01),与Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组比较差异有显著性意义(P < 0.05).结果显示悬滴三步法联合中药丹参与5-氮杂胞苷为诱导剂,可提高体外胚胎干细胞分化为心肌细胞的分化率.
关键词：胚胎干细胞分化心肌细胞5-氮杂胞苷丹参小鼠
分类号：R394.2(医学遗传学)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 92-95 )
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