人脐带血内皮祖细胞与血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子共培养及其增殖和迁移能力
周建良
邹明晖
陈义初
周诚
史嘉玮
董念国
1.华中科技大学附属协和医院心血管外科,湖北省武汉市,4300222.华中科技大学附属协和医院心血管外科,湖北省武汉市,4300223.华中科技大学附属协和医院心血管外科,湖北省武汉市,4300224.华中科技大学附属协和医院心血管外科,湖北省武汉市,4300225.华中科技大学附属协和医院心血管外科,湖北省武汉市,4300226.华中科技大学附属协和医院心血管外科,湖北省武汉市,430022
摘要：背景:目前组织工程心脏瓣膜再内皮化种子细胞主要来源于成熟内皮细胞,内皮祖细胞作为内皮细胞的前体细胞越来越受到人们的关注.目的:分离和扩增人脐带血内皮祖细胞,观测其体外生物学特性.方法:密度梯度离心法分离新鲜的脐血中单个核细胞,在含血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的培养液中培养扩增,通过形态学、免疫荧光和流式细胞仪等对贴壁细胞进行鉴定;并与脐静脉内皮细胞进行增殖和迁移能力比较.结果与结论:随着培养和诱导时间延长,贴壁细胞形态发生明显的改变,从小圆形变成梭形,逐渐分化成典型成熟内皮细胞的鹅卵石样形态,并可形成特征性的克隆;体外诱导7 d后90%以上贴壁细胞呈Dil-ac-LDL和FITC-UEA-I双阳性;贴壁细胞流式细胞仪分析显示:培养7 d的细胞VEGFR-2、CD34和CD133表达分别占(77.4±4.9)%、(52.4±6.6)%和(19.4±2.1)%,培养28 d的细胞VEGFR-2和CD34表达分别占(81.1±7.4)%和(7.6±3.1)%,而未检测到CD133表达;人内皮祖细胞增殖和迁移能力明显高于人脐静脉内皮细胞(P < 0.05),并且细胞数量可扩增达109 L-1.结果显示用密度梯度离心法和贴壁筛选法,可从人脐带血分离、纯化内皮祖细胞;内皮祖细胞可诱导分化为内皮细胞,增殖和迁移能力都很强.
关键词：脐带血内皮祖细胞单个核细胞体外分离与培养组织工程心脏瓣膜
分类号：R394.2(医学遗传学)
资助基金：国家高技术研究发展计划（863计划）(863;2009AA03Z420)国家自然科学基金(30872540)武汉市晨光计划(200950431177)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1000-1004 )
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