重组人白细胞介素1受体拮抗蛋白荧光质粒在软骨细胞的表达
张平1
刘斌2
蔡道章2
钟志宏1
潘永谦1
张振山1
1.广州医学院第三附属医院骨外科,广东省广州市,5101502.中山大学附属第三医院骨外科,广东省广州市,510630
摘要:背景:白细胞介素1受体拮抗蛋白能延缓骨性关节炎进程,通过转基因方法可以使白细胞介素1受体拮抗蛋白表达的增加.目的:观察重组人重组人白细胞介素1受体拮抗蛋白荧光质粒的构建及经脂质体转染软骨细胞的表达情况.方法:双酶切法切取重组人白细胞介素1受体拮抗蛋白的c-DNA片段,通过T4DNA连接酶连接到pEGFP-C1载体上.体外分离培养兔关节软骨细胞,然后用构建的重组人白细胞介素1受体拮抗蛋白质粒经脂质体转染软骨细胞,通过荧光显微镜观察转基因的表达和荧光定量PCR检测其表达.结果与结论:获得重组人pEGFP-C1-IL-1Ra真核表达载体质粒,酶切及测序结果证明表达质粒的DNA序列完全正确.荧光显微镜观察有绿色荧光蛋白表达,荧光定量PCR鉴定证实转染的软骨细胞基因得到表达.
关键词:白细胞介素1受体拮抗蛋白基因转染荧光质粒软骨细胞表达
分类号:R318(医用一般科学)
论文发表日期:2011-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 1169-1173 )
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