脂质体介导法转染mIMCD-3细胞的可行性及最佳转染条件
高岑
史书龙
张旭
马跃荣
1.泸州医学院病理教研室,四川省泸州市,6460002.泸州医学院病理教研室,四川省泸州市,6460003.泸州医学院病理教研室,四川省泸州市,6460004.泸州医学院病理教研室,四川省泸州市,646000
摘要：背景:近年来阳离子脂质体成为基因转移较为常用的载体,但应用脂质体对mIMCD-3细胞株进行转染的相关报道较少.目的:探讨脂质体法转染mIMCD-3细胞株的可行性,并通过优化脂质体转染效率的影响因素,获得mIMCD-3的最佳转染条件.方法:以绿色荧光蛋白作为报告基因,采用脂质体LipofectamineTM 2000包裹pIRES2-EGFP质粒转染mIMCD-3细胞,分别按照细胞接种密度、DNA用量、DNA与脂质体的比例、不同的质粒抽提方法、血清有无设定分组,观察以上因素对mIMCD-3细胞转染效率的影响.结果与结论:采用脂质体LipofectamineTM 2000转染mIMCD-3细胞,在2×108 L-1细胞接种浓度、1 μg DNA用量、1∶3的DNA与脂质体比例时,转染效率最高.采用美国OMEGA公司生产的E.Z.N.A.Endo-Free Plasmid Mini Kit抽提的质粒能获得更高的转染效率.转染前漂洗细胞后换入无血清培养基比有血清组转染效率高(P < 0.01),而转染后6 h加入血清不影响转染效率.结果显示,脂质体法转染mIMCD-3细胞株是可行的,通过优化脂质体转染效率的影响因素,获得了mIMCD-3的最佳转染条件,可作为有关研究或应用的参考.
关键词：脂质体mIMCD-3细胞细胞转染转染效率组织工程
分类号：R318(医用一般科学)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 2739-2742 )
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