重组真核表达质粒pEGFP/hVEGF165转染兔成骨细胞条件的优化
陈国武
孟纯阳
蒋电明
胡侦明
1.重庆医科大学附属第一院骨科,重庆市,4000162.重庆医科大学附属第一院骨科,重庆市,4000163.重庆医科大学附属第一院骨科,重庆市,4000164.重庆医科大学附属第一院骨科,重庆市,400016
摘要：背景:血管内皮生长因子能够提高骨细胞的增殖能力,促进骨折局部血管发生,在骨缺损修复过程中发挥着至关重要的作用.目的:优化重组真核质粒pEGFP/hVEGF165转染兔成骨细胞的条件,为构建新型组织工程骨种子细胞提供实验基础.方法:体外分离、培养并鉴定兔成骨细胞.分别应用0.8,1.0,1.2 μg的质粒和1.5,2.0,2.5,3.0 μL脂质体两两组合,通过脂质体法将重组真核表达质粒pEGFP/hVEGF165转染入兔成骨细胞,转染48 h后倒置荧光显微镜下观察并测定转染率.结果与结论:随着脂质体剂量的增加,成骨细胞死亡增多.转染48 h后,倒置荧光显微镜下可见细胞质内发绿色荧光的小颗粒成弥散分布,或在核周浓集成块状.其中,脂质体2.5 μL和质粒1.2 μg条件下的转染率最高,可达56%.说明质粒与脂质体之间的交互作用能够显著影响转染率,脂质体2.5 μL和质粒1.2 μg是转染兔成骨细胞的最佳条件.
关键词：血管内皮生长因子质粒脂质体成骨细胞转染组织工程骨
分类号：R318(医用一般科学)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 3621-3624 )
英文信息