人脐带来源间充质干细胞分离培养方法的优化
齐凯
董丽媛
陈显久
赵婕
薛国芳
陈彦
牛勃
1.山西医科大学生物化学与分子生物学教研室,山西省太原市,0300202.山西医科大学生物化学与分子生物学教研室,山西省太原市,0300203.山西医科大学生物化学与分子生物学教研室,山西省太原市,0300204.山西医科大学生物化学与分子生物学教研室,山西省太原市,0300205.山西医科大学生物化学与分子生物学教研室,山西省太原市,0300206.山西医科大学生物化学与分子生物学教研室,山西省太原市,0300207.山西医科大学生物化学与分子生物学教研室,山西省太原市,030020
摘要：背景:关于人脐带间充质干细胞的分离培养方法不一,如何提高人脐带来源间充质干细胞获得效率的问题尚未解决.目的:优选人脐带来源间充质干细胞制备的消化酶组分.方法:无菌条件下取正常足月剖腹产的脐带近胎儿段,按不同混合酶浓度比值划分为3组,混合酶Ⅰ组成分为0.4%Ⅱ型胶原酶、0.1%胰酶、0.02%EDTA和0.1%透明质酸酶;混合酶Ⅱ组成分为0.1%Ⅱ型胶原酶、0.4%胰酶、0.02%EDTA和0.1%透明质酸酶;混合酶Ⅲ组成分为0.3%Ⅱ型胶原酶、0.1%胰酶、0.02%EDTA、0.1%透明质酸酶和0.1%DNA酶.每组再按消化时间分为1,2,3 h 3个亚组.最后重悬细胞终体积均定位4 mL并计数,采用含血清的DMEM培养液体外培养细胞.结果与结论:采用3种不同混合酶浓度进行消化,发现相同消化时间内,混合酶Ⅲ组消化细胞最多(P<0.05).在作用3 h时,混合酶Ⅲ组获取的细胞中活细胞比值显著低于混合酶Ⅰ组和混合酶Ⅱ组(P<0.01).提示0.3%Ⅱ型胶原酶、0.1%胰酶、0.02%EDTA、0.1%透明质酸酶和0.1%DNA酶混合液消化脐带组织块2 h为获取脐带间充质干细胞的最佳条件.
关键词：脐带间充质干细胞Ⅱ型胶原酶透明质酸酶DNA酶Ⅰ
分类号：R394.2(医学遗传学)
资助基金：国家自然科学基金(30600226)国家自然科学基金(30472251)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 4220-4224 )
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