多次胶原酶消化法培养小鼠椎间盘髓核细胞
张兴凯
曹鹏
王君
梁裕
吴文坚
1.上海交通大学医学院附属瑞金医院骨科,上海市伤骨科研究所,上海市,2000252.上海交通大学医学院附属瑞金医院骨科,上海市伤骨科研究所,上海市,2000253.上海交通大学医学院附属瑞金医院骨科,上海市伤骨科研究所,上海市,2000254.上海交通大学医学院附属瑞金医院骨科,上海市伤骨科研究所,上海市,2000255.上海交通大学医学院附属瑞金医院骨科,上海市伤骨科研究所,上海市,200025
摘要：背景:椎间盘为无血运组织,椎间盘髓核细胞为分化终末细胞,细胞增殖能力较差,体外培养难度较大.目的:探索小鼠椎间盘髓核细胞体外分离培养的方法.方法:取小鼠椎间盘髓核组织,使用多次胶原酶消化的方法,分离培养髓核组织细胞,接种,传代,取第2代细胞,分别采用免疫细胞化学和RT-PCR方法检测椎间盘髓核细胞特征性分泌物Ⅱ型胶原和聚合蛋白的分泌量及mRNA的表达,并与软骨细胞,成骨细胞及成纤维细胞进行比较.结果与结论:椎间盘髓核细胞贴壁后呈现软骨细胞的形态;Ⅱ型胶原和聚合蛋白染色均为阳性;Ⅱ型胶原和聚合蛋白mRNA表达与软骨细胞相同,与成纤维细胞和成骨细胞存在明显差别.说明多次胶原酶消化的方法可以获得大量纯净的椎间盘髓核细胞,性状稳定.
关键词：椎间盘退变椎间盘髓核细胞体外培养Ⅱ型胶原聚合蛋白
分类号：R318(医用一般科学)
资助基金：国家自然科学基金(81071502)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 5136-5140 )
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