重组pcDNA3.1-hBMP-2转染兔脂肪干细胞体外诱导的成骨分化
安荣泽
王兆杰
刘凡凡
齐新文
袁小洪
陈军平
赵俊延
胡小军
杨晋
赵豪
1.遵义医学院第五附属(珠海)医院,广东省珠海市,5191002.遵义医学院第五附属(珠海)医院,广东省珠海市,5191003.遵义医学院第五附属(珠海)医院,广东省珠海市,5191004.遵义医学院第五附属(珠海)医院,广东省珠海市,5191005.遵义医学院第五附属(珠海)医院,广东省珠海市,5191006.遵义医学院第五附属(珠海)医院,广东省珠海市,5191007.遵义医学院第五附属(珠海)医院,广东省珠海市,5191008.遵义医学院第五附属(珠海)医院,广东省珠海市,5191009.遵义医学院第五附属(珠海)医院,广东省珠海市,51910010.遵义医学院第五附属(珠海)医院,广东省珠海市,519100
摘要：背景:骨形态发生蛋白2 具有很强的诱导干细胞成骨活性.目的:构建人骨形态发生蛋白2 基因真核表达载体,探讨其转染脂肪干细胞后的成骨效果.
方法:通过噬菌斑原位杂交筛选人混合细胞cDNA 文库获得人骨形态发生蛋白2基因,与真核表达载体pcDNA3.1-连接,构建重组质粒pcDNA3.1-hBMP-2.利用脂质体LipofectamineTM2000分别介导人骨形态发生蛋白2基因、EGFP基因转染第4 代脂肪干细胞,并经G418 进行筛选.结果与结论:酶切鉴定及DNA 测序结果证实重组质粒pcDNA3.1-hBMP-2 构建成功.经计算脂质体介导的脂肪干细胞瞬时转染率为(18.0±0.42)%,并经过G418 筛选后获得了稳定转染的细胞.细胞生长曲线表明转染后对脂肪干细胞生长、增殖无明显影响.ELISA 检测发现人骨形态发生蛋白2 组的人骨形态发生蛋白2 因子表达量均高于EGFP组及未转染组,且能够稳定表达.经人骨形态发生蛋白2 基因转染的脂肪干细胞的Ⅰ型胶原含量、碱性磷酸酶活性以及钙结节数目均比EGFP组及未转染组有明显升高.
关键词：骨形态发生蛋白2脂肪源性干细胞脂质体转染骨组织工程
分类号：R318(医用一般科学)
资助基金：贵州省省长基金课题"组织工程软骨"资助(黔科通NV 字(2006)62-2)珠海市医学重点建设专科基金资助(珠卫2008(80))
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 7601-7606 )
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