鸡胚胎干细胞分离方法和培养体系的优化
张曼玉1
陈志胜2
计慧琴2
陈胜峰2
刘本杰1
邓衔柏1
王丙云2
袁立3
江青艳4
1.华南农业大学兽医学院,广东省广州市,5106422.佛山科学技术学院生命科学学院动物医学系,广东省佛山市,5282313.厦门大学生命科学学院生物医学系,福建省厦门市,3610054.华南农业大学动物科学学院,广东省广州市,510642
摘要：背景:胚胎干细胞是从动物早期胚胎的内细胞团或原始生殖细胞分离出来的具有发育全能性的一种未分化的无限增殖细胞系.而鸡胚胎干细胞则是从X期鸡胚的胚盘分离而来.目的:优化鸡胚胎干细胞分离方法和离体培养体系.方法:采用滤纸纸环-发环的方法从X期鸡胚分离胚盘细胞,并采用STO细胞作为饲养层和大鼠肝细胞(BRL)条件培养基(CM)+细胞因子作为离体培养体系对分离的胚盘细胞进行培养.结果与结论:滤纸纸环-发环法获得的完整胚盘率为75%~85%,克隆形成率约为50%.BRL-CM+饲养层培养体系,鸡胚胎干细胞可传至7代,而BRL-CM+饲养层+细胞因子培养体系,鸡胚胎干细胞可传至25代.分离到的鸡胚胎干细胞,经碱性磷酸酶染色、SSEA-1染色鉴定,表明鸡胚胎干细胞处于未分化状态.提示,实验不仅优化了鸡胚胎的分离方法,获得完整且杂质少的胚盘,而且进一步优化了鸡胚胎干细胞体外培养体系.
关键词：鸡胚胎干细胞分离培养细胞因子
分类号：R394.2(医学遗传学)
资助基金：国家重点基础研究发展计划（973计划）(2009CB941600)国家自然科学基金(31072101)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 8429-8433 )
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