改良型混合酶消化法培养小鼠乳腺上皮细胞
易琼1
王鲁1
李圆方2
朱伟2
1.贵州大学动物科学学院,贵州省贵阳市,5500252.贵州省生化工程中心,贵州省贵阳市,550025
摘要：背景:目前采用的A型胶原酶和胰蛋白酶混合酶分离乳腺细胞团的方法操作复杂,实验条件要求高.目的:观察改良型混合酶消化法能否成功进行乳腺上皮细胞的体外培养.方法:采用Ⅰ型、Ⅱ型胶原酶和胰蛋白酶(1∶1∶1)混合消化直接用眼科剪剪碎的小鼠乳腺组织,37 ℃振荡消化获取乳腺细胞团,并采用差速贴壁法去除成纤维细胞,将细胞团接种于细胞培养瓶进行培养.结果与结论:倒置显微镜下观察显示,改良型混合酶消化法能获得较多的细胞团,且培养12 h后细胞团绝大多数贴在细胞瓶壁,培养72 h后细胞团完全铺开融合成片,细胞呈典型的铺路石样.免疫荧光细胞化学染色结果显示,培养细胞角蛋白18呈阳性反应.说明应用改良型混合酶消化法能在短时间内获得大量较纯的乳腺上皮细胞.
关键词：改良型混合酶消化法乳腺上皮细胞角蛋白18细胞培养小鼠
分类号：R318(医用一般科学)
资助基金：国家自然科学基金(31060347)贵州大学研究生创新基金(2010020)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 9335-9338 )
英文信息