新生昆明小鼠胰腺干细胞体外分离、培养及自然分化的潜能
岑妍慧
何国珍
黄波
黄荣师
贾微
彭岳
玉光强
1.广西医科大学组胚教研室,广西壮族自治区南宁市,5300312.广西医科大学组胚教研室,广西壮族自治区南宁市,5300313.广西医科大学组胚教研室,广西壮族自治区南宁市,5300314.广西医科大学组胚教研室,广西壮族自治区南宁市,5300315.广西医科大学组胚教研室,广西壮族自治区南宁市,5300316.广西医科大学组胚教研室,广西壮族自治区南宁市,5300317.广西医科大学组胚教研室,广西壮族自治区南宁市,530031
摘要:背景:关于胰腺干细胞在胰腺组织中的分布情况,以及如何有效的将其分离、体外优化培养,目前仍有一定的困难.目的:从新生昆明小鼠胰腺组织中分离出胰腺干细胞,在体外条件下培养观察其形态学和生物学特征,并进行初步鉴定.方法:取新生SPF级昆明小鼠的胰腺组织,使用Ⅴ型胶原酶消化,采用Percoll不连续密度梯度离心,使胰腺组织内、外分泌部细胞分离,分布在3个不同的密度界面;收集各界面的细胞,以无血清、添加碱性成纤维细胞生长因子和表皮细胞生长因子的DMEM培养基培养.结果与结论:通过细胞形态学和细胞生长特性的观察,结合双硫腙染色证实:采用Percoll不连续密度梯度离心,第一、二密度界面的细胞来源于胰腺内分泌部;第三密度界面细胞来源于胰腺外分泌部.分别从胰腺内、外分泌部获取胰腺组织细胞,在体外培养观察发现均存在一类大、圆、单个核的细胞,呈集落样附壁生长,具有较活跃的分裂增殖能力,碱性磷酸酶染色阳性,表达胰腺干细胞的特异性标志巢蛋白,即为胰腺干细胞;随着体外培养时间的延长,分别表达PDX-1和CK-19,呈现向胰腺内分泌部细胞和外分泌部细胞分化的趋势.
关键词:胰腺干细胞NestinPDX-1CK-19分化潜能
分类号:R394.2(医学遗传学)
资助基金:由广西科技厅自然科学基金青年基金项目(2010GXNSFB013070)广西教育厅科研项目(200911LX197)
论文发表日期:2012-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 1019-1023 )
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