用于甲醛固定石蜡包埋组织的改良免疫荧光法
侯昌禾1
张阳春1
余世明2
李子卿1
翟齐毅3
张紫机1
盛璞义4
1.中山大学附属第一医院关节外科,广东省广州市,5100802.中山大学附属第一医院黄埔关节外科,广东省广州市,5107003.横沥医院骨科,广东省东莞市,5234604.中山大学附属第一医院关节外科,广东省广州市,510080;中山大学附属第一医院黄埔关节外科,广东省广州市,510700;中山大学附属第一医院骨科研究所,广东省广州市,510700
摘要：背景:甲醛固定石蜡包埋的标本易于保存,免疫荧光法定位定量能精确支持多种标记物.目的:建立适合于甲醛固定石蜡包埋组织的改良免疫荧光法.方法:将取自类风湿性关节炎和无骨性关节炎患者的滑膜血管翕和髋臼增生组织的石蜡切片进行常规脱蜡复水,观察不同的柠檬酸缓冲液热修复时间、血清封闭时间、一抗浓度和荧光标记物在免疫荧光法中显色的差异.结果与结论:柠檬酸高温修复15 min 后滴加抗原修复液比单纯高温修复10～20 min,组织结构保存更为完整,且背景染色无显著区别;选择体积分数10%二抗来源正常血清室温封闭40 min 作为最佳的抗原封闭条件,既可以保证良好的封闭效果,同时又不影响一抗和抗原位点结合;较高一抗浓度(10 mg/L) 能保证明显的荧光信号、低背景和可接受的成本.进行石蜡切片免疫荧光实验,并用普通荧光显微镜观察,应避免采用FITC 等蓝色激发光、呈现绿色荧光信号的标记染料基团.提示柠檬酸高温修复15 min 后滴加抗原修复液,选择体积分数10% 二抗来源正常血清室温封闭40 min,较高一抗浓度,普通荧光显微镜观察可提高免疫荧光法的检测质量.
关键词：石蜡包埋甲醛固定免疫荧光免疫病理标本组织
分类号：R318(医用一般科学)
资助基金：国家自然科学基金(81171710)广东省科技厅高新技术产业化项目(IRAK-M;2011B010500012)新型用于人工膝关节感染翻修术的间隔体的设计开发(Spacer)国家国际科技合作专项基金(2010B050300009)关节假体植入体内后TLRs与变化的相关性研究(CD4+CD25+Treg)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1188-1192 )
英文信息