沉默膜联蛋白A1基因影响兔骨髓间充质干细胞的增殖及成骨分化能力
梁博伟1
潘新元2
赵劲民1
殷国前2
胡峰1
1.广西医科大学第一附属医院创伤骨科手外科,广西壮族自治区南宁市,5300212.广西医科大学第一附属医院整形外科,广西壮族自治区南宁市,530021
摘要：背景:膜联蛋白A1蛋白参与细胞的增殖和分化的调控.激素性股骨头坏死与骨髓间充质干细胞增殖和分化能力的改变相关.目的:观察沉默膜联蛋白A1基因对兔骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化能力的影响.方法:将新西兰大白兔的骨髓间充质干细胞分离培养后分为RNA干扰组,用携带针对膜联蛋白A1基因的短发夹RNA慢病毒载体LV-shANXA1感染骨髓间充质干细胞下调膜联蛋白A1基因的表达;阴性对照组,用携带无义基因序列的慢病毒载体LV-shANXA1-NC感染骨髓间充质干细胞;空白对照组,不加任何干预措施.结果与结论:纯化后的骨髓间充质干细胞CD44和CD105表达阳性率分别为97.2%和95.8%,而CD45阳性率为2.5%.经嘌呤霉素筛选后,感染复数为50时,LV-shANXA1对骨髓间充质干细胞感染效率为80%;感染复数为100时,感染效率为95%.实时 PCR 和Western blot检测显示感染复数为50时,LV-shANXA1对膜联蛋白A1基因的沉默效率效率可达72.4%以上.膜联蛋白A1表达下调后,骨髓间充质干细胞出现明显生长抑制,在随后成骨分化诱导后,细胞的碱性磷酸酶染色阳性率和碱性磷酸酶活性明显降低,且茜素红染色呈阴性反应.表明沉默膜联蛋白A1基因降低骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化能力,这可能是激素性股骨头坏死发病机制之一.
关键词：膜联蛋白A1基因沉默骨髓间充质干细胞成骨分化细胞增殖激素性股骨头缺血性坏死
分类号：R394.2(医学遗传学)
资助基金：国家自然科学基金(30860285)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 3421-3426 )
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