重组XIAP对H2O2诱导小肠上皮细胞凋亡的保护作用
张娴
黄羽
曾星
1.广州中医药大学第二附属医院,广东省广州市,5100062.广州中医药大学第二附属医院,广东省广州市,5100063.广州中医药大学第二附属医院,广东省广州市,510006
摘要：背景:XIAP在细胞抗凋亡中发挥关键作用,能作为与凋亡相关的多种疾病预防治疗的靶点.目的:构建大鼠重组XIAP表达质粒,观察其对H2O2诱导细胞凋亡的保护作用和机制.方法:采用RT-PCR从大鼠小肠上皮细胞IEC-6扩增出大鼠XIAP基因ORF序列,插入pCMV6-AC-GFP载体,重组成pXIAP-GFP表达质粒,测序鉴定.以重组pXIAP-GFP与对照质粒pCMV6-AC-GFP转染IEC-6细胞,Western blot检测细胞重组XIAP的表达,同时在H2O2诱导细胞凋亡后,MTT法检测细胞存活,Western blot检测细胞Casepase-3表达.结果与结论:经测序证实pXIAP-GFP重组序列正确,Western blot证实将其转染IEC-6细胞后细胞正确表达XIAP,表明pXIAP-GFP重组质粒构建成功;在转染质粒和H2O2诱导凋亡后,与对照质粒pCMV6-AC-GFP组比较,pXIAP-GFP组细胞 A值增高,Caspase- 3表达降低.表明重组XIAP能通过抑制Caspase-3的表达抵抗H2O2诱导的细胞凋亡.
关键词：重组XIAPH2O2细胞凋亡Caspase-3小肠上皮细胞IEC-6细胞
分类号：R318(医用一般科学)
资助基金：国家自然科学基金(81001563)广东省中医药局项目(2010400)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 5212-5215 )
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