大鼠腹腔脂肪干细胞的分离培养及诱导成骨***********☆
李玲慧1
丁道芳1
龚浩2
杜国庆1
宋奕1
邓真1
詹红生1
1.上海市中医药研究院骨伤科研究所,上海市,2012032.中国中医科学院,北京市,100102
摘要:背景:脂肪干细胞取材方便、增殖旺盛、具有多向分化潜能,有望取代骨髓间充质干细胞而成为新一代组织工程的种子细胞。然而,脂肪干细胞的分离培养仍存在诸多困难与不足。目的:优化脂肪干细胞的分离培养方法,并鉴定其成骨分化潜能。方法:选取200 g成年雌性大鼠1只,无菌环境下切取大鼠肾脏、子宫周围及腹后外侧白色脂肪组织,多次胶原酶消化法分离消化,低糖培养基培养脂肪干细胞,倒置显微镜下观察脂肪干细胞的形态变化及增殖能力。采用成骨诱导培养液对第3代细胞进行成骨诱导,并采用碱性磷酸酶、茜素红染色方法进行鉴定。结果与结论:脂肪干细胞形态以长梭形为主,增殖活跃呈旋涡状生长。经成骨诱导10 d后,碱性磷酸酶染色为阳性;成骨诱导28 d后,茜素红染色阳性。提示采用多次酶消化法得到的大鼠腹腔源性脂肪干细胞在体外易于分离培养,可以稳定传代。在一定条件诱导下,可以向成骨细胞分化。采用以上方法进行脂肪干细胞的分离培养可以为组织工程提供大量、优质的种子细胞。
关键词:干细胞脂肪干细胞种子细胞分离培养成骨分化诱导腹腔矿化结节碱性磷酸酶矫形外科组织工程:国家自然科学基金干细胞图片文章
分类号:R394.2(医学遗传学)
资助基金:中医骨伤科学国家重点学科建设项目(100508)国家自然科学基金(81073114)国家自然科学基金(81001527)国家自然科学基金(81102603)国家自然科学基金(81173621)上海市领军人才项目(041)上海高校中医脊柱病损研究创新团队建设项目(2009-26)上海市科委重点项目(09dZ1973800)上海市科委重点项目(08411950300)上海市科委重点项目(11DZ1973400)上海市科委重点项目(11XD1404600)
论文发表日期:2013-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:8( 4232-4239 )
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