肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体修饰的人羊水间充质干细胞**
杜晶春1
朱蕊2
范婷婷1
王鹏鲲1
林勇平1
徐霞1
1.广州医学院第一临床学院检验系,广东省广州市,5101822.广州医学院第一附属医院妇产科,广东省广州市,510120
摘要:背景:以间充质干细胞为载体的基因治疗新方法具有广阔的应用价值。目的:利用慢病毒感染方法将肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体导入人羊水来源的间充质干细胞,以期获得稳定表达肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的人羊水间充质干细胞。方法:首先利用多位点 Gateway技术构建慢病毒表达载体 pLVpuro/EF1α-肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体,将该表达载体与慢病毒包装质粒同时转染293FT 细胞,从而获得携带肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因的慢病毒颗粒。利用重组慢病毒颗粒感染人羊水间充质干细胞,并通过抗生素筛选的方法获得稳定表达目的基因-肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的羊水间充质干细胞,并对其稳定性进行鉴定。结果与结论:酶联免疫吸附法和Western blot检测结果表明,肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体蛋白在感染的人羊水间充质干细胞内呈高表达,其表达量可达到72μg/L。说明实验成功制备了肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体修饰的人羊水间充质干细胞。
关键词:干细胞干细胞培养与分化人羊水间充质干细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因修饰慢病毒载体多位点稳定表达目的基因293FT细胞组织工程国家自然科学基金干细胞图片文章
分类号:R394.2(医学遗传学)
资助基金:国家自然科学基金(81101730)广州医学院第一附属医院院级项目(Y201013)
论文发表日期:2013-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:7( 4272-4278 )
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