骨髓间充质干细胞向软骨细胞的分化*★
陈亮1
何少茹2
庄建1
郑曼利2
孙云霞2
梁穗新2
刘玉梅2
孙新2
陈晓博1
1.广东省心血管病研究所,广东省广州市,5100802.广东省人民医院 广东省医学科学院,广东省广州市,510080
摘要： 背景：以骨髓间充质干细胞构建组织工程气管尚缺乏理想的特异性表面标志物，对其鉴定主要依赖细胞形态学、细胞表型及诱导分化的功能进行分析。目的：体外分离培养、鉴定兔骨髓间充质干细胞，观察在特定条件下向气管软骨细胞分化的潜能。方法：无菌环境取兔骨髓，经全骨髓贴壁筛选法分离培养细胞至第2代，流式细胞术鉴定第1、第2代细胞表面抗原 CD44、CD45的表达。无菌环境取气管，经酶消化法分离培养气管软骨细胞，甲苯胺蓝染色鉴定软骨细胞蛋白聚糖的合成。在使用转化生长因子β1的基础上，将骨髓间充质干细胞与气管软骨细胞通过Transwel 小室非接触式共培养，倒置显微镜观察细胞形态，甲苯胺蓝染色鉴定蛋白聚糖的合成，荧光实时定量 PCR 鉴定Ⅱ型胶原和蛋白聚糖 mRNA 的表达。结果与结论：分离、培养的细胞呈长梭形、不规则形聚集生长，传代后细胞生长速度明显增快，呈鱼群状聚集生长。第1代有96.97%的细胞表达 CD44、13.72%的细胞表达 CD45，第2代有99.11%的细胞表达 CD44、8.54%的细胞表达 CD45。气管软骨细胞甲苯胺蓝染色阳性。在诱导后，骨髓间充质干细胞形态逐渐由长梭形变为三角形或不规则形，表达软骨细胞特异性Ⅱ型胶原和蛋白聚糖 mRNA 基因，甲苯胺蓝染色示阳性。结果表明全骨髓贴壁筛选法可成功分离培养骨髓间充质干细胞，第2代纯度较高，且在特定诱导条件下具有分化为气管软骨细胞的潜能。
关键词：干细胞骨髓干细胞骨髓间充质干细胞流式细胞术气管软骨细胞分离培养诱导分化鉴定部级基金干细胞图片文章
分类号：R394.2(医学遗传学)
论文发表日期：2013-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 4951-4957 )
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