骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化前后基因及Ca2+浓度的变化★
潘国强
齐凤平
徐洪
王相利
1.迁安市人民医院,河北省迁安市,0644002.迁安市人民医院,河北省迁安市,0644003.迁安市人民医院,河北省迁安市,0644004.迁安市人民医院,河北省迁安市,064400
摘要： 背景：单唾液酸四己糖神经节苷脂(Monosialotetrahexosylganglioside，GM1)在神经细胞的生长发育、分化、再生和细胞内外信息传递等多种生理过程中发挥重要作用。目的：探讨 GM1对骨髓间充质干细胞按照 Woodbury 经典诱导方案将其诱导分化为神经元样细胞前后基因方面和细胞内游离 Ca2+浓度的变化。方法：分离纯化 SD 大鼠骨髓间充质干细胞进行传代培养，传至第5代时，待细胞融汇成致密单层后，加入50 mmol/L 神经节苷脂设为 GM1组，预培养24 h 后按照 Woodbury 经典诱导方案进行诱导，设置对照组，采用免疫组化和 Realtime PCR 技术分别检测诱导前后生长相关蛋白43、神经元特异性烯醇化酶、神经丝蛋白和神经巢蛋白的蛋白和 mRNA 表达的变化，采用激光扫描共聚焦显微镜检测诱导前后细胞内游离钙离子浓度的变化。结果与结论：①加入 GM1组诱导分化后较对照组生长相关蛋白43、神经元特异性烯醇化酶、神经丝蛋白和神经巢蛋白表达水平增高(P <0.05)，GM1能够促骨髓间充质干细胞诱导分化为神经元样细胞。②更换诱导液后，两组细胞内荧光强度逐渐增加，到100 s 达高峰值，其后逐渐减弱，但20 min 时细胞荧光强度仍高于诱导前，加入 GM1组，细胞内游离 Ca2+浓度较对照组有所增加(P <0.05)。说明 GM1能够促进细胞内 Ca2+浓度增加，游离 Ca2+在诱导过程中可能有促进作用。③诱导后生长相关蛋白43、神经元特异性烯醇化酶、神经丝蛋白和神经巢蛋白基因表达改变不显著，说明 Woodbury 经典诱导方案可能为转录后水平即蛋白水平的调控。
关键词：干细胞骨髓干细胞神经节苷脂骨髓间充质干细胞神经元样细胞诱导分化免疫组化聚合酶链反应激光扫描共聚焦显微镜细胞内游离钙离子生长相关蛋白 43神经元特异性烯醇化酶神经丝蛋白神经巢蛋白干细胞图片文章
分类号：R394.2(医学遗传学)
论文发表日期：2013-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 5080-5086 )
英文信息