一种高效实用的人卵巢表面上皮细胞培养方法**★
周聪
康佳丽
王小霞
杨文娟
蒋文燕
1.广州医科大学附属广州市第一人民医院妇产科,广东省广州市,5101802.广州医科大学附属广州市第一人民医院妇产科,广东省广州市,5101803.广州医科大学附属广州市第一人民医院妇产科,广东省广州市,5101804.广州医科大学附属广州市第一人民医院妇产科,广东省广州市,5101805.广州医科大学附属广州市第一人民医院妇产科,广东省广州市,510180
摘要： 背景：体外分离培养纯度高、活力强且生物学特性稳定的卵巢表面上皮难度很大，目前原代培养主要采用组织块贴壁法和酶消化法，但这两种方法在取材、细胞活力及细胞纯度上都存在一定的问题。目的：建立一种高效实用的人卵巢表面上皮分离、培养和鉴定方法。方法：创新性地运用细胞刷刷取人卵巢表面上皮，以红细胞裂解法、差速贴壁法对细胞进行分离纯化，并向无血清 DMEM-F12培养基中添加人表皮生长因子进行细胞培养。在倒置显微镜下观察细胞形态，应用苏木精-伊红染色和免疫细胞化学染色法对细胞进行鉴定，并绘制生长曲线。结果与结论：卵巢表面上皮培养24 h 开始贴壁生长，7-12 d 后基本达到融合，细胞呈多角形或扁平型，透光性及折光性强。细胞形态符合正常上皮细胞特性，所分离的细胞几乎完全表达上皮细胞表面标志物 CK19。细胞生长良好，可以传6-8代，细胞生长曲线呈“S”形，纯度达95%以上。结果提示细胞刷取培养法操作简单，能够快速分离获得大量卵巢表面上皮，所获得的细胞经红细胞裂解法和差速贴壁法处理后纯度达95%以上，且细胞生长稳定。
关键词：组织构建组织构建细胞学实验人卵巢表面上皮原代培养人表皮细胞生长因子苏木精-伊红染色免疫细胞化学生长曲线省级基金
分类号：R318(医用一般科学)
论文发表日期：2013-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 5223-5228 )
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