Notch-1基因敲除兔骨髓间充质干细胞可阻止椎间盘退行性变吗?
莫日格乐
邵增务
1.华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科,湖北省武汉市,4300222.华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科,湖北省武汉市,430022
摘要:背景:前期实验证明退变椎间盘内 Notch-1基因高表达,但骨髓间充质干细胞向髓核样细胞转化时 Notch-1的作用尚不明确。<br> 目的:观测Notch-1基因敲除后的骨髓间充质干细胞修复退变椎间盘的作用。<br> 方法:①4只体质量0.4-0.5 kg新西兰兔麻醉后,取股骨骨髓,以密度梯度离心法分离培养骨髓间充质干细胞。②将针对Notch-1的shRNA及无意空质粒shRNA,瞬时转染入骨髓间充质干细胞,转化生长因子β1诱导转染骨髓间充质干细胞分化。③体质量1.0-1.5 kg新西兰兔10只,对兔脊柱L3-4、L4-5、L5-63个椎间盘行穿刺抽吸髓核组织造模,将细胞分为转化生长因子β1诱导转染空质粒组、转化生长因子β1诱导转染shRNA-Notch-1质粒组、转化生长因子β1诱导无转染组细胞,于造模2周后分别移植入L3-4、L4-5、L5-63个椎间盘。<br> 结果与结论:①细胞移植4周后MRI检测发现,L3-4(无转染组)及L5-6(空质粒组)%T2加权像扫描(%ST2WI)值有明显增加,L4-5(shRNA-Notch-1质粒组)%ST2WI值增加最为显著,与其他2组比较差异有显著性意义(P<0.05)。②甲苯胺蓝染色可见L4-5(shRNA-Notch-1质粒组)椎间盘组织内蛋白多糖的表达显著高于L3-4(无转染组)及L5-6(空质粒组)。③RT-PCR和Western blot检测发现L4-5(shRNA-Notch-1质粒组)椎间盘内Ⅱ型胶原及蛋白多糖的表达明显高于 L3-4(无转染组)及 L5-6(空质粒组),差异有显著性意义。结果提示兔退变椎间盘内移植Notch-1基因敲除兔骨髓间充质干细胞,有效修复了退变的椎间盘组织。
关键词:干细胞骨髓干细胞骨髓间充质干细胞Notch-1转化生长因子基因敲除退变椎间盘甲苯胺蓝染色Ⅱ型胶原蛋白多糖T2加权像扫描干细胞图片文章
分类号:R394.2(医学遗传学)
论文发表日期:2013-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 6403-6408 )
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