冻存脐带间充质干细胞向成骨细胞的分化
陈妍1
潘丽杰1
袁杰1
李天侠2
1.哈尔滨医科大学附属口腔医学院口腔预防保健科,黑龙江省哈尔滨市,1500012.哈尔滨医科大学附属口腔医学院口腔修复科,黑龙江省哈尔滨市,150001
摘要:背景:在骨组织工程中,脐带间充质干细胞是的一种新兴的种子细胞。目前认为低温冻存是长期保存细胞的有效方法。<br>  目的:探究冻存的脐带间充质干细胞能否被诱导分化成成骨细胞。<br>  方法:采用组织块贴壁法从脐带的华尔通氏胶组织中分离出间充质干细胞。然后,用倒置显微镜观察原代细胞的细胞形态。脐带间充质干细胞的免疫表型和细胞周期用流式细胞仪检测。在冻存6个月后,复苏第2代脐带间充质干细胞进行冻存复苏,并传代培养至12代。对第12代的脐带间充质干细胞进行成骨诱导,它的成骨能力分别通过碱性磷酸酶活性检测,骨钙素和骨涎蛋白的免疫荧光检测以及茜素红染色检测来确定。<br>  结果与结论:原代脐带间充质干细胞呈现典型的成纤维细胞样形态。流式细胞仪显示培养的细胞高表达间充质干细胞的表面标志CD73、CD105和CD90,但是不表达造血细胞的表面标志CD34和CD45。复苏后细胞的存活率是90%。细胞周期显示P8的细胞有75%处于G0/G1期,25%处于S+G2M期。经成骨诱导液处理的第12代细胞显示出比对照组更高的碱性磷酸酶活性(P <0.01)。此外,在成骨诱导液中诱导的细胞对骨钙素和骨涎蛋白的染色呈阳性,并形成矿化了结节。冻存后的脐带间充质干细胞仍保持了它们的生物学特性,并且在成骨诱导液中能被诱导分化成成骨细胞。
关键词:干细胞脐带脐血干细胞脐带间充质干细胞成骨分化成骨细胞免疫表型组织块贴壁法骨钙蛋白骨涎蛋白省级基金干细胞图片文章
分类号:R394.2(医学遗传学)
论文发表日期:2013-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:7( 6436-6442 )
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中国组织工程研究

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北大核心CSTPCD
ISSN:1673-8225
年,卷(期):2013,(36)
所属栏目:研究与报告 -- 脐带脐血干细胞