小鼠间充质干细胞三系分化中SOX9与Ⅱ型胶原mRNA的定量
梁大川
白洁玉
杜少华
程鹏
康宁
王震
黄强开
杨自权
1.山西医科大学第二医院骨科,山西省太原市,0300012.山西医科大学第二医院骨科,山西省太原市,0300013.山西医科大学第二医院骨科,山西省太原市,0300014.山西医科大学第二医院骨科,山西省太原市,0300015.山西医科大学第二医院骨科,山西省太原市,0300016.山西医科大学第二医院骨科,山西省太原市,0300017.山西医科大学第二医院骨科,山西省太原市,0300018.山西医科大学第二医院骨科,山西省太原市,030001
摘要：背景：研究表明，软骨中的主要成分Ⅱ型胶原的基因-Col2a1在软骨细胞中的表达与SOX9的浓度呈剂量依赖正相关关系。<br> 目的：通过成骨、成软骨、成脂肪诱导干细胞分化，分析3种分化过程及不同时期的SOX9与Ⅱ型胶原 mRNA含量的变化，探讨SOX9在不同时空分布的表达规律及与Ⅱ型胶原的相关关系。<br> 方法：取4周龄昆明小鼠骨髓间充质细胞，体外培养得到间充质干细胞并传达至第3代，对间充质干细胞进行流式细胞仪鉴定细胞表型，共分3组每组设3个时间段，通过成骨、成软骨、成脂肪3种诱导培养液对3组细胞进行诱导，另设不进行诱导的细胞作为对照组。分别在诱导3，7，14 d后收集提取细胞的总RNA，通过RT-PCR进行SOX9与Ⅱ型胶原的mRNA定量检测，同时对诱导后的细胞进行染色、免疫荧光染色，观察其分化状态及相关统计分析。<br> 结果与结论：第3代骨髓间充质干细胞生长良好，流式细胞仪鉴定细胞表型证实为干细胞，对诱导后细胞进行染色、免疫荧光染色结果证实细胞分化为骨、软骨、脂肪细胞。经RT-PCR检测，在3组诱导分化细胞中SOX9 mRNA 含量由高到低分别是成软骨、成骨、成脂肪，Ⅱ型胶原 mRNA 含量由高到低分别是成软骨、成脂肪、成骨。在成软骨分化中SOX9在3，7 d表达不断升高，14 d呈下降趋势。Ⅱ型胶原在3，7，14 d均逐渐升高。在成骨分化中SOX9 mRNA含量随着时间推移而增加，而Ⅱ型胶原则随着时间推移而不断降低。在成脂肪分化中SOX9 mRNA表达与对照组比较差异无显著性意义(P >0.05)；而Ⅱ型胶原的表达没有规律可循，时间点的延伸及检测未观察到。结果提示，SOX9在软骨分化中作用优于成骨、成脂肪组，且软骨分化中SOX9与Ⅱ型胶原存在相关性，可能在软骨分化的早期Ⅱ型胶原随着SOX9的变化而变化；且软骨分化和成骨分化过程中SOX9可能起到了一个互相协调促进平衡的关键作用。
关键词：干细胞干细胞培养与分化骨髓间充质细胞SOX9Ⅱ型胶原三系分化成软骨成脂肪成骨mRNA定量国家自然科学基金干细胞图片文章
分类号：R394.2(医学遗传学)
资助基金：国际科技合作项目(2010DFA32450)国家自然科学基金资助项目(30973048)国家人事部及山西省人事厅留学回国人员科技活动择优资助项目；山西省留学基金项目(107)；山西省自然科学基金资助项目(2010011050-6)International Scientific and Technological Cooperation Program, (No.2010DFA32450)the National Natural Science Foundation of China, (No.30973048)Foundation of Shanxi Province for Returned Chinese Scholars, (No.107)the Natural Science Foundation of Shanxi Province, (No.2010011050-6)
论文发表日期：2013-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 6489-6494 )
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