真核表达载体pcDNA3-ICOSIg的构建及表达
赵国华1
张睿2
许国岩3
王冬梅4
1.辽宁省肿瘤医院胃外科,辽宁省沈阳市,1100422.辽宁省肿瘤医院大肠外科,辽宁省沈阳市,1100423.沈阳市铁西区华康医院外科,辽宁省沈阳市,1100264.辽宁陆军预备役高射炮一师三团,辽宁省沈阳市,110048
摘要：背景：人可诱导共刺激分子(ICOS)是迄今发现的重要共刺激分子家族成员，可促进激活T细胞的增殖和分泌、调节Th1/Th2细胞的极化、增强依赖T细胞的B细胞功能，阻断ICOS共刺激信号会导致T细胞的克隆失活或克隆无反应，从而诱导肿瘤对机体的免疫逃逸。<br> 目的：构建表达ICOSIg的质粒，观察其在小鼠体内的表达。<br> 方法：克隆编码ICOS的胞外片段，将其与编码小鼠免疫球蛋白IgG恒定片段(Ig)的基因融合，构建ICOSIg融合基因及其分泌型真核表达载体 pcDNA3-ICOSIg，酶切鉴定重组子，测序，利用阳性脂质体载体包被pcDNA3-ICOSIg转染小鼠右侧大腿肌肉组织，Western blot法检测血清ICOSIg水平。<br> 结果与结论：经测序鉴定证实pcDNA3-ICOSIg质粒目的基因片断与Genbank上公布的ICOS序列完全一致，说明质粒构建成功。脂质体载体包被pcDNA3-ICOSIg转染小鼠7 d，在小鼠血清中检测到ICOSIg的阳性表达，说明 pcDNA3-ICOSIg 能够在小鼠肌细胞内表达。证实利用基因合成和重组技术可成功构建真核表达载体pcDNA3-ICOSIg。
关键词：组织构建组织构建基础实验真核表达肿瘤共刺激信号人可诱导共刺激分子免疫球蛋白质粒基因转染省级基金
分类号：R318(医用一般科学)
论文发表日期：2013-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 6641-6644 )
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