Myod1和Myog真核共表达载体构建及鉴定
高宏飞
梁炳生
双卫兵
1.山西医科大学外科学教研室,山西省太原市,0300012.山西医科大学外科学教研室,山西省太原市,0300013.山西医科大学外科学教研室,山西省太原市,030001
摘要：背景：目前研究发现，生肌调节因子家族的各成员之间具有相互协同和相互促进的作用。因此，联合应用Myod1和Myog两个成员进行基因治疗，可能会取得更好的疗效，能够为防治失神经支配骨骼肌萎缩寻找新的思路。<br> 目的：构建Myod1和Myog基因的真核共表达载体。<br> 方法：通过RT-PCR的方法克隆大鼠Myod1和Myog基因的全长cDNA，酶切后依次插入到pVAX1载体中，以构建重组的Myod1和Myog真核共表达载体pVAX1-Myod1-IRES2-Myog-IRES2-EGFP，采用基因测序的方法进行鉴定。将pVAX1-Myod1-IRES2-Myog-IRES2-EGFP对体外培养的3T3细胞进行转染，利用Western blot检测3T3细胞中Myod1蛋白和Myog蛋白的表达，验证其能否正确表达目的蛋白。<br> 结果与结论：基因测序结果表明，真核共表达载体 pVAX1-Myod1-IRES2-Myog-IRES2-EGFP 内的 Myod1和 Myog cDNA 的序列长度及碱基顺序均与所公布的序列相同。将该载体转染到体外培养的3T3细胞内， Western blot能够检测到3T3细胞中Myod1和Myog蛋白的条带。结果证实，实验成功构建了重组Myod1和Myog真核共表达载体pVAX1-Myod1-IRES2-Myog-IRES2-EGFP。
关键词：组织构建组织构建基础实验Myod1Myog真核共表达载体基因转染基因测序失神经支配骨骼肌萎缩国家自然科学基金
分类号：R318(医用一般科学)
资助基金：国家自然科学基金面上项目(81000805)
论文发表日期：2013-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 6645-6651 )
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