Ⅱ型胶原酶消化结合组织块贴壁法分离培养兔髓核细胞
李树文1
武海军2
银和平1
白明1
杜志才1
1.内蒙古医科大学第二附属医院,内蒙古自治区呼和浩特市,0100302.内蒙古自治区呼和浩特市第一医院,内蒙古自治区呼和浩特市,010020
摘要：背景：椎间盘为负重却缺乏血运的组织，在体外培养过程中存在表型丢失问题，因而容易发生退行性改变，但椎间盘退变的机制尚不明确。<br> 目的：探讨兔髓核细胞分离、贴壁培养、扩增和鉴定的方法，并观察髓核细胞在不同代次的生长特性。<br> 方法：应用Ⅱ型胶原酶消化法和组织块贴壁法相结合的方法，分离、纯化髓核细胞并进行体外扩增，用倒置显微镜观察各代细胞的形态、生长状况，计数细胞数量，并绘制细胞生长曲线。苏木精-伊红染色后光镜下观察细胞形态，免疫细胞化学方法检测细胞Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的表达情况，并进行细胞鉴定。<br> 结果与结论：成功的实现了兔髓核细胞体外分离、培养及扩增。生长特性观察发现，髓核细胞第1-3代细胞增殖能力强，活力旺盛，但随着传代次数的增加，细胞增殖能力程逐渐下降的趋势。分离培养的髓核细胞阳性表达聚集蛋白聚糖和Ⅱ型胶原。体外采用Ⅱ型胶原酶消化法和组织块贴壁法相结合，可获得高纯度的髓核细胞，培养的髓核细胞呈类圆形或多角形生长，第1-3代细胞生长活性较强。
关键词：骨关节植入物骨关节损伤基础实验髓核细胞Ⅱ型胶原酶消化法组织块贴壁法Ⅱ型胶原聚集蛋白聚糖体外培养细胞增殖省级基金
分类号：R318(医用一般科学)
论文发表日期：2013-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 6861-6866 )
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