Ca2+参与骨髓间充质干细胞存活增殖及向肝细胞的诱导分化
焦淑贤
胡彬
赵林
刘晓华
冯智慧
1.青岛市中心血站输血医学研究所,山东省青岛市,2660712.青岛市中心血站输血医学研究所,山东省青岛市,2660713.青岛市中心血站输血医学研究所,山东省青岛市,2660714.青岛市中心血站输血医学研究所,山东省青岛市,2660715.青岛市中心血站输血医学研究所,山东省青岛市,266071
摘要:背景:骨髓间充质干细胞增殖和分化中的具体机制仍不清楚,Ca2+信号、骨髓间充质干细胞增殖与分化信号如何协调和交叉成复杂信号网络等问题仍有待研究阐明。<br> 目的:探讨细胞内Ca2+在骨髓间充质干细胞向肝细胞定向诱导分化过程中的作用。<br> 方法:用全骨髓贴壁法从大鼠骨髓中分离骨髓间充质干细胞后进行纯化和扩增,并加入肝细胞生长因子诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞分化,应用流式细胞技术分别检测肝细胞生长因子诱导分化骨髓间充质干细胞和对照骨髓间充质干细胞内游离[Ca2+]i。将不同浓度的尼莫地平加入肝细胞生长因子诱导的骨髓间充质干细胞(肝细胞生长因子组)培养液中进行干预后分为3组:肝细胞生长因子+尼莫地平10 mg/L组、肝细胞生长因子+尼莫地平50 mg/L组、肝细胞生长因子+尼莫地平100 mg/L组,在倒置相差显微镜下观察细胞生长情况并用免疫细胞化学法检测AAT的表达;并用RT-PCR检测对照组和尼莫地平干预组钙调蛋白mRNA的表达,免疫印迹法检测上述各组磷酸化ERK的表达。<br> 结果与结论:①加入肝细胞生长因子诱导分化的骨髓间充质干细胞内[Ca2+]i显著高于对照组(P<0.05)。②加入较大剂量的尼莫地平干预后,未见分化细胞且骨髓间充质干细胞的生长状态差;肝细胞生长因子+尼莫地平各组表达AAT的阳性细胞很少。③与对照组比较,肝细胞生长因子组和肝细胞生长因子+尼莫地平10 mg/L组钙调蛋白mRNA表达显著增加了(P<0.05),肝细胞生长因子+尼莫地平50 mg/L组、肝细胞生长因子+尼莫地平100 mg/L组与对照组比较组间差异无显著性意义(P>0.05)。说明Ca2+不仅参与细胞因子诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞的定向分化,而且也参与维持骨髓间充质干细胞的存活和增殖。
关键词:干细胞骨髓干细胞骨髓间充质干细胞Ca2+肝细胞生长因子细胞因子细胞分化ERK干细胞图片文章
分类号:R394.2(医学遗传学)
资助基金:青岛市科技发展计划(09-1-1-25-nsh)the Qingdao Science and Technology Support Plan Project, (No.09-1-1-25-nsh)
论文发表日期:2013-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 7028-7033 )
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