雌激素受体β基因沉默对成骨样MG63细胞骨保护素和RANKL表达的影响
王昱翔
张宏其
郭超峰
唐明星
刘少华
邓盎
高琪乐
邓展生
陈静
刘金洋
吴建煌
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摘要：背景：目前对雌激素β受体基因如何参与骨代谢的研究较少。目的：研究雌激素受体β对人成骨样细胞骨保护素、核因子kB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand，RANKL)表达的影响。方法：将先前含有最有效干扰序列及非特异性shRNA的反转录病毒分别感染人成骨样MG63细胞株后，筛选稳定克隆并扩大培养，以空白及非特异性shRNA作为对照，检测稳定抑制雌激素受体β的效率。分别向3组细胞即MG63细胞、雌激素受体βshRNA反转录病毒感染的MG63细胞、阴性对照shRNAnc反转录病毒感染的MG63细胞加入17β-雌二醇(E2)干预，检测人成骨样细胞株MG63的骨保护素、RANKL mRNA和蛋白表达情况。结果与结论：用pRNAT-H1.4/Retro-雌激素受体β-shRNA3进一步稳转人成骨样MG63细胞株，与空白及阴性病毒对照组相比，筛选出雌激素受体β表达稳定抑制的人成骨样细胞株，雌激素受体βmRNA 抑制率为(88.17±1.17)%(P<0.05)，蛋白抑制率为(89.01±1.22)%(P<0.05)，证实实验成功建立了人成骨样细胞ERβ亚型基因敲低细胞模型。雌激素干预48 h后，显示雌激素受体β稳定抑制的MG63细胞较空白组及阴性对照组骨保护素 mRNA及蛋白表达上调(P<0.05)，RANKL mRNA和蛋白表达下调(P<0.05)，骨保护素RANKL表达上调(P<0.05)，提示雌激素受体β可能通过调节骨保护素/RANKL在骨代谢中发挥作用。
关键词：组织构建骨组织构建雌激素受体βRNA干扰人成骨样细胞反转录病毒载体骨保护素RANKL国家自然科学基金
分类号：R318(医用一般科学)
资助基金：国家自然科学基金(81271940)湖南省自然科学基金(08JJ3057)湖南省科技厅科技一般项目(08FJ3171)中南大学自由探索项目(2012QNZT122)湖南省自然科学基金重点项目(12JJ2043)
论文发表日期：2013-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：11( 7188-7198 )
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