骨髓间充质干细胞中软骨调节素Ⅰ的稳定上调表达
周连仲1
崔成华2
冯亚3
邢双春3
翟立杰3
1.天津市第四中心医院&天津市耳鼻咽喉头颈外科医院,天津市,3001612.北京大学肿瘤医院&北京市肿瘤防治研究所,北京市,1000363.大连医科大学附属第一医院,辽宁省大连市,116011
摘要：背景：软骨调节素Ⅰ是一种糖蛋白，主要在软骨中表达，而在骨髓间充质干细胞中少量表达。结合课题组的前期研究，推断软骨调节素Ⅰ在诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化过程中可能会起促进作用。<br> 目的：构建软骨调节素Ⅰ表达载体，使其在大鼠骨髓间充质干细胞中稳定上调表达。<br> 方法：在大鼠软骨组织中获取软骨调节素Ⅰ目的基因，使用 pcDNA3.1(+)质粒表达载体构建pcDNA3.1(+)/ChM-I 表达载体。密度梯度离心法和贴壁培养法获得大鼠骨髓间充质干细胞。用脂质体法将构建的pcDNA3.1(+)/ChM-I表达载体转染大鼠骨髓间充质干细胞，使用G418稳定筛选转染细胞，用RT-PCR 及Western blot 检测软骨调节素Ⅰ在细胞株内的表达。<br> 结果与结论：对阳性克隆的双酶切鉴定及测序和分析对比，结果显示与软骨调节素Ⅰ基因长度相符并且序列无误，且读码框正确。RT-PCR及western blot检测结果显示，软骨调节素Ⅰ的mRNA及蛋白在骨髓间充质干细胞中稳定的高表达。实验成功构建了pcDNA3.1(+)/ChM-I表达载体，并成功将其转染到大鼠骨髓间充质干细胞中，最终使软骨调节素Ⅰ在大鼠骨髓间充质干细胞中稳定上调表达。
关键词：干细胞骨髓干细胞软骨调节素Ⅰ骨髓间充质干细胞软骨细胞载体生物因子组织工程国家自然科学基金干细胞图片文章
分类号：R394.2(医学遗传学)
论文发表日期：2013-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 7847-7854 )
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