诱导心脏肌成纤维细胞向心肌样细胞转分化的miRNA
张成1
章少中1
张亚洲2
张国恒1
王韵茹2
董红燕2
张中明1
1.徐州医学院心血管病研究所,江苏省徐州市,2210022.徐州医学院生物学教研室、神经生物学研究中心实验室,江苏省徐州市,221002
摘要: <br>  背景:微小 RNA(miRNA)是一类非编码小分子 RNA,miRNA参与调控基因表达,在促进前体细胞增殖与分化中发挥了重要的作用。miRNA是否可促进前体细胞向心肌细胞的分化则鲜见报道。 <br>  目的:验证转入特定miRNA(miRNA-1、miRNA-499)诱导新生小鼠心脏肌成纤维细胞转分化为心肌样细胞的可行性。 <br>  方法:体外培养新生小鼠心脏成纤维细胞,常氧培养传代至P2;37℃低氧(体积分数3%O2)培养48 h;免疫荧光染色检测心脏成纤维细胞特异性标记物波形蛋白的表达,免疫荧光染色、流式细胞技术检测心脏成纤维细胞向心脏肌成纤维细胞表型转化的标记物α-平滑肌激动蛋白的表达。实验分为4组:miRNA-1转染组、miRNA-499转染组、miRNA-1/miRNA-499共转染组及空白对照组,采用 miRNA 芯片检测心脏肌成纤维细胞与心肌细胞中微小RNA的表达差异;real-time qPCR方法验证芯片检测结果。 <br>  结果与结论:心脏肌成纤维细胞中过表达 miR-1、miR-499后,心脏发育不同阶段特异性因子发生不同程度的表达变化,与空白对照组相比,其余3组 GATA4、Tbx5、Mef-2c、α-MHC表达明显增高,Mesp1、Isl1表达均无显著变化。结果表明,特定miRNAs可诱导心脏肌成纤维细胞表达心肌细胞特异性性标志物,具备诱导心脏肌成纤维细胞向心肌细胞直接转分化的潜力。
关键词:干细胞干细胞培养与分化miR-1miR-499微小RNA心脏成纤维细胞心脏肌成纤维细胞转分化心肌细胞波形蛋白α-平滑肌激动蛋白国家自然科学基金干细胞图片文章
分类号:R394.2(医学遗传学)
论文发表日期:2013-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:8( 7924-7931 )
英文信息展开
中国组织工程研究

中国组织工程研究

北大核心CSTPCD
ISSN:1673-8225
年,卷(期):2013,(45)
所属栏目:技术与方法 -- 干细胞培养与分化