小干扰RNA对人类风湿关节炎患者滑膜细胞基因表达的影响
侯春凤1
孙闵2
李树杰1
赵建宏1
王吉波3
1.济宁市第一人民医院风湿免疫科,山东省济宁市,2720022.济宁医学院临床学院,山东省济宁市,2720133.青岛大学附属医院风湿免疫科,山东省青岛市,266071
摘要：背景：类风湿关节炎的病因尚不十分明确，但核转录因子κB在类风湿性关节炎发病中的作用，己逐渐引起风湿病学者的关注。<br> 目的：通过RNA干扰技术阻断人类风湿关节炎滑膜细胞核转录因子κB信号通路，探索其在类风湿关节炎治疗中的应用前景。<br> 方法：分离、消化、培养滑膜细胞备用。根据小分子干扰RNA设计原则，确定核转录因子κB的小分子干扰RNA 四条目标基因序列，合成并构建核转录因子κB小分子干扰RNA表达载体。将构建好的4条pGenesil-1/核转录因子κB小分子干扰RNA表达载体转染入生长状态良好的一代滑膜细胞，并设立空白和阴性对照组。收集转染后12 h、24 h、48 h、72 h、5 d、7 d不同时间段的细胞，并提取RNA。测定细胞内核转录因子κB mRNA相对表达水平，筛选出有效抑制核转录因子κB mRNA表达的小分子干扰RNA质粒载体。<br> 结果与结论：核转录因子κB在人类风湿关节炎滑膜细胞高表达，3#pGenesil-1/核转录因子κB能显著抑制人类风湿关节炎滑膜细胞核转录因子κB mRNA表达。RNA干扰技术可阻断核转录因子κB mRNA的表达，因此，可将阻断核转录因子κB信号通路作为基因治疗类风湿关节炎的靶点。
关键词：组织构建组织构建细胞学实验关节炎类风湿核转录因子κBpGenesil-1表达载体RNA干扰实时荧光定量聚合酶链反应
分类号：R318(医用一般科学)
论文发表日期：2013-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 8062-8068 )
英文信息