全骨髓贴壁接触培养SD大鼠骨髓间充质干细胞
宫宇
王鸿飞
夏海军
1.大连医科大学附属第二医院骨外科,辽宁省大连市,1160232.大连医科大学附属第二医院骨外科,辽宁省大连市,1160233.大连医科大学附属第二医院骨外科,辽宁省大连市,116023
摘要：背景：体外分离培养出生长状态好、高纯度、增殖能力强和数量充足的大鼠骨髓间充质干细胞，是将其作为种子细胞用于组织和细胞移植的重要前提。<br> 目的：建立简便、快速、有效的SD大鼠骨髓间充质干细胞体外分离培养方法，并观察其生物学特性。<br> 方法：采用全骨髓法将 SD 大鼠双侧股骨和胫骨骨髓细胞进行体外分离培养，贴壁接种法进行细胞纯化、传代。观察细胞生长形态及特征，绘制细胞生长曲线，检测细胞表面标记物，采用体外诱导剂诱导细胞分别向成骨、成软骨、成脂方向分化。<br> 结果与结论：全骨髓贴壁接种法分离培养的骨髓间充质干细胞生长旺盛、纯度高，细胞生长形态呈长梭形，极性排列，细胞生长呈S形生长曲线，群体倍增时间为29 h，细胞在连续传10代后仍具有较强的增殖能力。第3代骨髓间充质干细胞的表面标记物CD44、CD29、CD90均呈阳性表达，CD45、CD34、CD11b则呈阴性表达。第3代骨髓间充质干细胞分别经成骨、成软骨、成脂诱导剂诱导后，茜素红染色、碱性磷酸酶染色、von-kossa矿化结节染色、甲苯胺蓝染色和油红O染色均呈阳性。结果验证全骨髓贴壁接种法是一种简便可靠的体外分离培养方法，能获得纯度较高的骨髓间充质干细胞，经实验鉴定第3代骨髓间充质干细胞生物活性最佳，且具有多向诱导分化能力，适合作为后续实验的种子细胞。
关键词：干细胞骨髓干细胞骨髓间充质干细胞SD大鼠分离培养贴壁法诱导分化
分类号：R394.2(医学遗传学)
资助基金：辽宁省科学技术计划项目基金(2011225013)the Science and Technology Plan Project of Liaoning Province, (No.2011225013)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 51-56 )
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