脂肪干细胞的三维球形培养
王婵1
戴应1
郭永龙1
杨艳2
刘庆2
陈建苏3
1.暨南大学再生医学教育部重点实验室,广东省广州市,5106322.暨南大学医学院眼科研究所,广东省广州市,5106323.暨南大学再生医学教育部重点实验室,广东省广州市 510632; 暨南大学医学院眼科研究所,广东省广州市 510632
摘要:背景:大多哺乳类细胞在正常生理状态下多以三维结构存在,为还原细胞本身在体内的自然状态,很多研究者开始尝试在体外对细胞进行三维培养,球形培养是一种常见的三维培养模式。<br> 目的:尝试用3种不同的方法在体外对人脂肪干细胞进行球形培养,并观察其生物学特征。<br> 方法:对提取的脂肪来源细胞进行表面 Marker 流式检测以及成脂成骨诱导鉴定后,证实为脂肪干细胞。先后用低黏附培养法、hanging-drop培养法和Eppendorf管培养法3种方法在体外对脂肪干细胞进行球形培养,对3种方法形成球形的特点进行比较分析,并通过 Imagej 软件计算出3组多细胞球体的平均面积,利用Viability/Cytotoxicity Assay Kit for Animal Live&Dead Cel s试剂盒对3组多细胞球体进行活力检测。<br> 结果与结论:①通过流式细胞术鉴定细胞表型标志物,其中CD29,CD44,CD59完全阳性,同时成脂成骨诱导也为阳性,证实提取的细胞为脂肪干细胞。3代以内脂肪干细胞多呈长梭形,并克隆状生长。②低黏附培养法、hanging-drop 培养法、Eppendorf 管培养法均可使脂肪干细胞聚集成球形生长,但所成多细胞球形有所差异。低黏附培养法所形成的细胞球形大小不一,不易控制;而hanging-drop培养法和Eppendorf管培养法均可使脂肪干细胞形成大小均一的球形,但在大小和形成时间上有所不同。③3种不同方法所形成的球形细胞均保持较好的细胞活力。
关键词:干细胞脂肪干细胞诱导分化球形培养活力低黏附培养hanging-drop培养Eppendorf管培养国家自然科学基金
分类号:R394.2(医学遗传学)
论文发表日期:2014-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:8( 872-879 )
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