利用细胞外基质大规模扩增临床级人脂肪间充质干细胞
苏约翰1
卫超2
吕品雷2
曹蕴1
邱云2
郑青2
萧树东2
汪铮3
1.解放军第455医院，解放军南京军区生物细胞工程技术医学转化基地干细胞实验室，上海市 2000522.上海交通大学医学院附属仁济医院消化科，上海市消化疾病研究所干细胞实验室，上海市 2000013.解放军第455医院，解放军南京军区生物细胞工程技术医学转化基地干细胞实验室，上海市 200052; 上海交通大学医学院附属仁济医院消化科，上海市消化疾病研究所干细胞实验室，上海市 200001
摘要：背景：如何运用无血清培养体系大规模扩增处于未分化状态的脂肪间充质干细胞，并使其保持“干性”是脂肪间充质干细胞临床应用转化中急待解决的难题。
<br> 目的：建立含细胞外基质的脂肪间充质干细胞体外培养系统，验证其扩增细胞的高效性、有效性及安全性。方法：在无血清培养条件下，将体外分离得到的脂肪间充质干细胞分别接种在包被细胞外基质的培养板和传统二维塑料培养板上。经过体外扩增后，比较2种条件下细胞数量、细胞表面标记物表达、细胞衰老状况以及体外多向分化能力(诱导成脂、成骨和成软骨)的差异，考察脂肪间充质干细胞在含细胞外基质的培养条件下扩增后的临床安全性。
<br> 结果与结论：脂肪间充质干细胞扩增到第5代时，包被细胞外基质培养板的细胞产量已经是传统二维塑料培养板的10倍以上，流式细胞检测表明，在含细胞外基质条件下扩增的脂肪间充质干细胞仍保持了干细胞表面特定标记物的表达。细胞衰老检测结果显示，使用包被细胞外基质的培养板扩增脂肪间充质干细胞至第15代时，细胞仍几乎无老化现象，而使用二维塑料培养板扩增的细胞在第5代时已出现明显老化，传代后细胞增殖能力明显下降。体外多向诱导分化实验显示，脂肪间充质干细胞在含细胞外基质条件下扩增至第15代时仍具有成脂、成骨和成软骨的分化功能，并且与第5代时没有明显差异，同时显著优于传统培养条件下的第5代脂肪间充质干细胞。染色体核型分析及小鼠成瘤性试验结果表明，脂肪间充质干细胞在含细胞外基质条件下扩增后仍具备临床应用的安全性。以上结果证实，含细胞外基质的无血清培养系统可以更高效且安全地扩增出具有临床应用潜能的脂肪间充质干细胞。
关键词：干细胞脂肪干细胞脂肪间充质干细胞细胞外基质无血清培养体系二维塑料培养板体外扩增国家自然科学基金
分类号：R394.2(医学遗传学)
资助基金：上海市科委浦江人才计划(09PJ1407300)国家自然科学基金(30971468)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：11( 1521-1531 )
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