C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞生物学特性及饲养层制备
李颖
龚亚飞
陈欣洁
1.广州医科大学附属第三医院妇产科研究所,广东省广州市,5101502.广州医科大学附属第三医院妇产科研究所,广东省广州市,5101503.广州医科大学附属第三医院妇产科研究所,广东省广州市,510150
摘要:背景:昆明小鼠胚胎成纤维细胞是目前最常用的饲养层细胞,C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层的研究鲜有报道。<br>  目的:体外分离和培养C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞,制备饲养层,力求扩大小鼠胚胎成纤维细胞的来源。方法:用不同浓度胰蛋白酶分步消化法体外分离和培养C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞,观察其生物学特性,研究其生长规律,并制备小鼠胚胎成纤维细胞饲养层,检测干细胞在所制备饲养层上的生长状态。<br>  结果与结论:不同浓度胰蛋白酶分步消化法制备的C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞生长状态好,获得的成纤维细胞数量多,增殖活跃。在细胞冻存后1,2周、1,3,6个月内复苏的细胞存活率差异无显著性意义。C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞在第2-5代增殖旺盛,第6代以后细胞增殖出现明显下降。种植到培养皿上的C57BL/6小鼠饲养层细胞在种植后3 d内活力高,种植4 d以后细胞活力急剧下降。所以C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞来源的饲养层的最佳使用时间为灭活后3 d内,C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞饲养层和昆明小鼠胚胎成纤维细胞饲养层一样,能很好地支持胚胎干细胞及诱导多能干细胞生长。
关键词:组织构建成纤维细胞小鼠胚胎C57BL/6小鼠细胞增殖细胞活力饲养层
分类号:R318(医用一般科学)
资助基金:广东省高等学校科技创新项目(2012KJCX0087)Scientific and Technology Innovation Project of Universities in Guangdong, (No.2012KJCX0087)
论文发表日期:2014-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 1737-1742 )
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中国组织工程研究

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北大核心CSTPCD
ISSN:2095-4344
年,卷(期):2014,(11)
所属栏目:技术与方法 -- 组织构建细胞学实验